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目的:
对WWOX在膀胱癌中的表达情况及其机制进行研究,以探讨WWOX基因启动子区CpG岛甲基化在膀胱癌发生发展过程中的作用,为确定膀胱癌的发病机制和早期生物学诊断指标提供理论依据,为基因治疗寻找新的靶点奠定理论基础。
方法:
采用Real-Time PCR法检测组织中WWOX mRNA的表达情况;采用Western Blot法检测组织中WWOX蛋白的表达情况,采用MSP法检测组织和尿沉渣细胞中WWOX基因启动子区CpG岛的甲基化状态。
结果:
1、WWOX mRNA在膀胱癌组织中的平均表达量明显低于对应的癌旁正常组织中的平均表达量(P<0.05)。
2、膀胱癌组织中WWOX蛋白的表达量明显少于癌旁正常组织中的表达量(P<0.05)。
3、膀胱癌组织中WWOX基因启动子区CpG岛甲基化率明显高于癌旁正常组织。启动子区CpG岛甲基化组对WWOX mRNA的表达下调的影响要高于启动子区CpG岛非甲基化组。WWOX mRNA表达水平与WWOX基因启动子区CpG岛甲基化状态密切相关。膀胱癌组尿沉渣细胞中WWOX基因启动子区CpG岛甲基化率显著高于非肿瘤性泌尿系疾病对照组和健康志愿者对照组(P均<0.05)。尿液样本中WWOX基因启动子区CpG岛甲基化状况与对应的膀胱癌组织中是否出现WWOX基因启动子区CpG岛甲基化具有显著相关性。WWOX基因随着膀胱癌组织分级的增加,其启动子区CpG岛甲基化阳性率逐渐升高;同样,膀胱癌患者尿沉渣细胞中随着其对应癌组织分级的增加,启动子区CpG岛甲基化阳性率逐渐升高。
结论:
1、WWOX基因在膀胱癌组织及尿沉渣细胞中存在其基因启动子区CpG岛甲基化现象。
2、WWOX基因启动子区CpG岛的甲基化改变可以提示肿瘤细胞的潜在侵袭性。
3、WWOX基因启动子区CpG岛的异常甲基化是导致膀胱癌组织WWOX mRNA转录受阻及WWOX蛋白表达下调的重要原因之一。
4、尿沉渣细胞中WWOX基因启动子区CpG岛的甲基化检测,可以作为膀胱癌早期诊断与判断预后的无创指标。