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目的:通过在细胞水平研究SIRT1对宫颈癌C33A细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及其SIRT1与Notch信号通路相关蛋白的关系,探讨SIRTl在宫颈癌的发生发展中的作用。方法:以化学合成的靶向SIRT1基因的小干扰RNA(si RNA)转染C33A细胞,并分为四组:SIRT1-si RNA组、SIRT1阴性对照组、Lipofectamine?RNAi MAX组和空白细胞对照组。转染细胞72h后,分别提取各组细胞总RNA和蛋白,RT-PCR检测C33A细胞SIRT1 m RNA的表达,免疫印迹法检测C33A细胞中SIRT1、Notch1及Hes1等目的蛋白的表达,CCK-8法检测细胞增殖,分别应用Transwell细胞迁移实验及Transwell细胞侵袭实验检测C33A细胞的迁移及侵袭能力,流式Annexin V-PE双染法及Hoechst33258细胞核荧光染色法检测细胞凋亡。结果:RT-PCR结果表明:与空白细胞对照组及RNAi MAX组相比,SIRT1-si RNA组细胞SIRT1 m RNA表达明显下调(P<0.05)。Western blot结果显示:与空白细胞对照组、SIRT1阴性对照组、RNAi MAX组相比,SIRT1-si RNA组细胞SIRT1蛋白表达量明显下调(P<0.05),Notch1和Hes1蛋白的表达明显上调(P<0.05)。CCK-8细胞增殖实验结果表明:SIRT1-si RNA组细胞增殖抑制率为53.1%,SIRT1阴性对照组细胞增殖抑制率为35.4%,RNAi MAX组细胞增殖抑制率11.5%,SIRT1-si RNA组细胞增殖抑制率明显高于其他组。细胞迁移及侵袭实验结果显示:与SIRT1阴性对照组、RNAi MAX组和空白细胞对照组相比,SIRT1-si RNA组穿过人工基底膜细胞数明显减少(P<0.05)。流式细胞术结果表明:与SIRT1阴性对照组、RNAi MAX组和空白细胞对照组相比,SIRT1-si RNA组C33A细胞早期凋亡率明显增高(P<0.05)。Hoechst33258染色显示:SIRT1-si RNA组C33A细胞核有明显改变,呈现亮蓝色荧光,并可见凋亡小体,而空白细胞对照组、SIRT1阴性对照组、RNAi MAX组细胞核呈均匀淡蓝色。结论:SIRT1 si RNA不仅能有效抑制C33A细胞的增殖、迁移及侵袭等,而且可诱导C33A细胞凋亡,可能与Notch-Hes信号通路密切相关。