葡萄二倍体与四倍体品种间杂交胚挽救的研究

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:happy_hoo
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以葡萄二倍体品种和四倍体品种为亲本,配制7个杂交组合,利用胚挽救技术进行培育三倍体葡萄新种质的研究。杂交组合分别为‘无核白×巨峰’、‘克瑞森×巨峰’、‘火焰无核×巨峰’、‘Sweet Scarlet×巨峰’、‘摩尔多瓦×巨峰’、‘巨峰×摩尔多瓦’和‘巨峰×意大利’。在离体条件下,先进行胚发育培养8周,然后转接至萌发培养基萌发成苗,待新叶长出4~5片时,在培养室强光条件下进行炼苗,之后移栽至温室。本试验对影响胚挽救的取样时期、不同萌发培养基及生长调节剂、胚珠处理方式、低温处理果实和培养环境等因素进行了探讨,并利用流式细胞仪对二倍体葡萄×四倍体巨峰葡萄和四倍体巨峰×摩尔多瓦组合的杂种幼苗进行了倍性分析。主要研究成果如下:1.无核葡萄胚挽救过程中,幼胚最佳取样时期因母本基因型不同而异,‘火焰无核×巨峰’组合在授粉后40d、‘Sweet Scarlet×巨峰’组合和‘无核白×巨峰’组合在授粉后35d取样进行胚挽救成苗率较高。2.适宜的生长调节剂种类及浓度可促进胚的发育和萌发,在幼胚萌发培养基中添加0.2mg/L IAA可显著提高胚珠萌发率,而添加BA和IBA未对胚萌发产生显著影响。3.胚珠进行一定时间的低温处理,可以有效解除种子休眠,且促进胚的发育与萌发成苗,接种前将果穗置于4℃低温条件下处理30d能显著提高胚的萌发率,接种后低温处理抑制胚的萌发。4.葡萄珠被对胚的发育和萌发成苗具有一定阻碍作用,直接剥取裸胚萌发较快,且能显著提高杂交胚的成苗率;而横切胚珠时,‘火焰无核×巨峰’组合出现多胚苗,将多胚苗连续继代3次,大部分可以萌发出新芽,成为正常幼苗。5.水解酪蛋白对细胞生长表现为促进作用,发育培养基中添加500mg/L水解酪蛋白,可以显著提高杂种植株的成苗率。6.采用胚挽救技术获得了杂种幼苗61株,通过流式细胞仪对杂种后代进行早期倍性分析,得到四倍体幼苗1株、三倍体幼苗31株和二倍体29株。7.将‘Sweet Scarlet×巨峰’、‘火焰无核×巨峰’、‘无核白×巨峰’、‘巨峰×意大利’、‘巨峰×摩尔多瓦’这5个杂交组合的87株杂种幼苗进行温室移栽,共成活74株,成活率为85.59%。
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