中华绒螯蟹是我国重要的特色水产养殖品种,并在江浙沪地区形成了独具一格的蟹文化,产生了显著的社会经济效益。但是,从养殖的角度看该蟹存在包括抖抖病和水鳖子病等疾病问题,从基础研究的角度看该蟹乃至其他甲壳动物的免疫反应机制研究仍显不足。因此,对中华绒螯蟹免疫反应机制的研究不仅有助于更好的理解甲壳动物免疫防御体系,还将对疾病防控产生深远的影响。和其他无脊椎动物相同,中华绒螯蟹仅依赖先天免疫完成对病原微生物危险信号的侦测和处理,而Toll和IMD信号通路是已知的无脊椎动物关键信号转导途径。本课题组前期研究发现脂肪酸结合蛋白(FABP)能够与细菌结合,抑制细菌的生长,但其能否能够通过胞内信号通路来间接应对病菌的入侵尚不清楚。中华绒螯蟹三种FABP的抗菌功能都已得到证实,但它们的基因结构信息并不完整,在病菌入侵时的时空表达信息也并不全面。在本研究中,我们首先克隆得到中华绒螯蟹FABP3和FABP9的基因全长,结合已知的FABP10基因全长,对比后发现,三种FABP的基因结构相同,都包含有四个长度接近的外显子和数量相同的内含子。而直接用金黄色葡萄球菌和副溶血弧菌体内注射中华绒螯蟹血腔后,三种FABP的mRNA表达量也都发生了显著上调,和用PAMPs注射的结果趋势一致,但又不尽相同。用金黄色葡萄球菌和副溶血弧菌刺激培养的中华绒螯蟹原代血细胞,结果与体内注射基本一致。在中华绒螯蟹中,作为一种重要的免疫效应因子,抗菌肽被血细胞分泌后,能够直接抑制和杀灭病原菌。为了深入了解FABP的抗菌功能,在本研究中,我们采用基因干扰技术,探究了 FABP对抗菌肽表达的影响。首先,我们成功干扰掉了血细胞中FABP3的表达,并在菌刺激条件下验证了干扰结果。接着,对血细胞上清液中的细菌CFU测定发现,FABP3的干扰使得菌刺激后血细胞上清培养液中的CFU明显升高,而对应的抗菌肽却明显下调。最后,对Toll通路中Dorsal蛋白的免疫荧光定位发现,FABP3的干扰能够影响菌刺激后血细胞Dorsal的入核。综合以上实验结果,我们得出,FABP3能够通过影响Dorsal的入核,影响抗菌肽表达,应对微生物的入侵。本研究进一步补充和完善了中华绒螯蟹FABP的结构信息,并有助于更好的理解中华绒螯蟹FABP的免疫功能,并为甲壳动物的免疫调控研究提供了新思路和参考。