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二硫化碳（Carbon disulfide,CS2）是一种应用广泛的有机溶剂,为全身性毒物,可累及人体多系统多器官,神经系统是二硫化碳作用的主要靶器官,其毒作用机制尚不完全清楚。大量流行病学调查资料表明,长期接触一定浓度的CS2可使记忆力受到不同程度的影响。动物实验业已证实CS2能使染毒动物的行为发生改变。但目前对于CS2对学习记忆影响机制方面缺乏研究,本研究通过观察不同浓度CS2对大鼠学习记忆功能、海马组织超微结构、自由基代谢和NOS的影响以及VitE的干预作用,探讨CS2对大鼠学习记忆功能的影响及其机制,为临床预防和治疗CS2中毒提供理论依据。第一部分二硫化碳对大鼠学习记忆功能的影响目的:观察CS2对大鼠学习记忆功能的影响。方法:将60只大鼠随机分为对照组和三组CS2染毒组（分别为50mg/m3组、250mg/m3组、1250mg/m3组）,每组15只。采用动式吸入染毒,将大鼠置于容积为60L的有机玻璃染毒柜内,每天染毒4h,每周5d,对照组染毒装置内无CS2,与染毒组放置时间相同。2个月后,Morris水迷宫及跳台实验检测实验大鼠的学习记忆功能。结果:与对照组相比,各染毒组Morris水迷宫测试显示染毒后大鼠平均逃逸潜伏期延长,在原平台象限的游泳时间缩短,差异具有显著性意义;而且随着CS2染毒浓度的增加大鼠平均逃逸潜伏期有延长的趋势,在原平台象限的游泳时间有缩短的趋势;跳台实验结果显示CS2染毒后大鼠训练期间的错误次数（SD1）增加,250mg/m3组和1250mg/m3组与对照组比较差异有显著性意义;24h后大鼠第一次跳下平台的潜伏期（SDL）缩短,5min内错误总数（SD2）增加,各染毒组与对照组比较均有显著性差异;而且SD1和SD2有随CS2染毒浓度的增加而增加的趋势,SDL有随CS2染毒浓度的增加而缩短的趋势。结论:低浓度CS2亚急性中毒即可导致大鼠学习记忆能力障碍。大鼠CS2亚急性中毒所致的学习记忆障碍有随CS2浓度增高而严重的趋势。第二部分二硫化碳对大鼠海马组织氧自由基代谢的影响及VitE的干预作用目的:探讨CS2对大鼠海马组织超微结构和氧自由基代谢的影响以及VitE对CS2致脂质过氧化作用的影响。方法:以吸入染毒法制作不同浓度CS2中毒大鼠模型;染毒2个月后,透射电镜观察海马组织超微结构;分别以TBA法、硝酸还原酶法、黄嘌呤氧化酶法和化学比色法检测各组大鼠海马的丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）含量以及超氧化物歧化酶（SOD）活性;观察染毒同时应用不同剂量维生素E（VitE）干预后上述自由基代谢变化情况。结果:电镜下主要表现为,神经元染色质聚集,核膜、胞膜皱缩或溶解,线粒体内出现空泡,线粒体脊结构破坏,50 mg/m3组神经元结构无明显改变,1250 mg/m3组损害最为严重。与对照组比较,各染毒组大鼠海马MDA含量增加,SOD活性降低,NO含量降低,经检验差异均有统计学意义。染毒同时给予不同剂量VitE干预后,各浓度CS2染毒组MDA含量均有不同程度减少,当VitE量达到100mg/kg时,海马MDA含量各染毒组与无干预组比较差异有显著性意义;SOD活性有不同程度增加,当VitE量达到200mg/kg时,海马SOD活性各染毒组与无干预组比较差异有显著性意义;NO含量有不同程度增加,当VitE量达到200mg/kg时,50 mg/m3组海马NO含量与无干预组比较差异有显著性意义。结论:CS2所致的大鼠学习记忆能力减退与氧自由基对海马组织的损伤及NO代谢障碍有关;应用VitE可干预CS2的致脂质过氧化作用。第三部分二硫化碳对大鼠海马一氧化氮合酶活力和基因表达的影响目的:探讨CS2对大鼠海马一氧化氮合酶活力和基因表达的影响。方法:以吸入染毒法制作不同浓度CS2中毒大鼠模型;染毒2个月后,以NOS测定试剂盒测定大鼠海马结构型一氧化氮合酶（cNOS）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性;以半定量逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）法测定海马nNOS-mRNA和iNOS-mRNA含量的变化;免疫组织化学染色,光镜下观察nNOS和iNOS在大鼠海马的表达情况。结果:与对照组比较,各染毒组大鼠海马cNOS活性降低,RT-PCR显示nNOS-mRNA含量减少,免疫组化染色显示nNOS表达减少,差异有显著性意义。各染毒组iNOS活性与对照组比较差异无显著性意义,iNOS-mRNA含量比对照组增加,免疫组化染色显示iNOS表达增加,250mg/m3组、1250mg/m3组与对照组比较差异有显著性。结论:CS2致大鼠海马cNOS活力降低及nNOS-mRNA含量减少可能是CS2干扰学习记忆功能的机制之一。第四部分大剂量VitE对二硫化碳染毒大鼠学习记忆能力的影响目的:探讨大剂量VitE对CS2染毒大鼠学习记忆能力以及海马组织超微结构的影响。方法:以吸入染毒法制作不同浓度CS2中毒大鼠模型,染毒同时给予200mg/kg VitE。染毒2个月后,应用Morris水迷宫和跳台实验检测大鼠学习记忆能力;透射电镜观察海马组织超微结构。结果:与无干预组比较,染毒同时给予200mg/kgVitE,大鼠平均逃逸潜伏期缩短,空间搜索实验显示大鼠经过7天寻找水下平台的学习后,在原平台象限的游泳时间延长,SD2减少,SDL延长,50 mg/m3组差异有显著性意义。200mgVitE+250 mg/m3CS2组神经元染色质聚集,核膜及胞膜皱缩,但程度较无VitE干预组减轻,200mgVitE+1250 mg/m3CS2组改变不明显。结论:大剂量VitE可部分减轻CS2导致的大鼠海马组织损伤;大剂量VitE可以预防低浓度CS2对大鼠学习记忆功能的影响。