猕猴去细胞神经支架移植联合细胞外ATP诱导神经再生的实验研究

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目的:制备同种异体去细胞神经支架并联合靶肌肉内注射ATP,修复猕猴桡神经缺损,研究这种联合法与单纯去细胞神经支架及自体神经移植修复效果的区别,为其作为自体神经移植替代治疗提供理论依据。方法:切取长4cm直径约为3~3.5mm猕猴下肢神经8段,利用3%TritonX-100及4%脱氧胆酸钠溶液重复消化成为去细胞神经支架;将6只成年雄性猕猴随机分为3组,每组2只,分别为实验组(GroupA)、空白对照组(GroupB)、自体移植组(GroupC),将这三组做成双侧上臂桡神经缺损模型后做如下处理:A组:同种异体去细胞神经支架修复上臂桡神经缺损,术后前臂伸肌群内每日ATP注射;B组:同种异体去细胞神经支架修复上臂桡神经缺损;C组:自体上臂桡神经原位回植。术后6个月,观察猕猴肢体功能恢复,神经电生理检测桡神经传导速度,甲苯胺蓝染色计算神经轴突数目及平均面积,HE染色观察神经的再生情况,NF免疫组化染色观察神经纤维的形态结构,透射电镜观察神经超微结构。结果:大体观察:术后六个月,三组营养不良性改变均减轻,三组再生神经外观均接近正常神经组织,A、C组肌肉萎缩程度较B组轻,A、C组皮肤感觉及运动功能恢复相似,B组差于A、C组。桡神经传导速度,A组恢复好于B组(P<0.05),但略差于C组(P<0.05)。再生神经的轴突计数A、B组均小于C组(P<0.05、P<0.0001),A、B组间无统计学差异(P>0.05),说明C组术后6个月神经轴突的数量明显好于A、B组;轴突的平均面积A组大于C组(P<0.05),C组大于B组(P<0.0001),说明A组的平均面积恢复好于B、C组。结论:1、同种异体去细胞神经支架可以作为神经纤维生长通道,引导神经纤维生长并与组织相容性好,不引起明显排斥反应;2、神经支架移植联合靶肌肉注射ATP比单纯神经支架移植能获得更大程度的恢复,ATP可以促进周围神经再生,并可缓解肌肉萎缩;3、联合移植方案修复神经缺损可能成为自体神经移植不能实现时的替代方法。
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