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本研究通过构建真核表达系统及双荧光素酶报告基因系统，分别对EDN1 SNP rs5370与EPO SNP rs551238多态位点的生物功能进行分析，拟阐明该多态位点的作用机制，为此两个多态位点作为遗传分子标记提供科学依据。 研究一：全基因组合成EDN1 GG基因型cDNA序列，并连接至pcDNA3.1(+)，构建GG型重组质粒。基因定点突变方法构建TT型重组质粒。转染实验分组：无质粒对照组（B组）；空质粒对照组（C组）；GG基因型组（G组）；TT基因型组（T组）。共计4组，转染至293T细胞，转染细胞培养48h收取细胞培养上清液，放射免疫方法检测上清液ET含量。结果：重组质粒测序比对结果显示，GG、TT基因型序列与EDN1基因cDNA序列符合率100％，重组质粒构建成功。细胞培养上清液ET含量测定结果显示，重组质粒转染组的ET-1浓度均高于对照组。GG基因型组ET-1浓度最高，且与空白组相比，有显著性差异（P<0.05）。TT基因型组ET-1浓度低于GG基因型组，TT基因型组与各组间相比，无显著性差异。结论：EDN1 SNP rs5370对ET-1表达不明显。 研究二：全基因组合成包含rs551238多态位点的增强子-启动子转录调控元件，并将该重组调控元件连接至pGL3-basic质粒，构建相应的荧光素酶报告基因载体。以pGL3-basic、pGL3-Promter、pGL3-EPO-G、pGL3-EPO-T共计4组分别转染至293T细胞与HepG2细胞。采用Dual-Luciferase Reporter Assay System检测荧光素酶表达情况。结果：重组质粒测序与EPO增强子-启动子调控元件序列一致。细胞转染48h后，293T细胞与HepG2细胞中均表现为pGL3-EPO-G质粒的荧光素酶表达量大于pGL3-EPO-T，且均有显著性差异（P<0.01）。结论：携带EPO SNP rs551238 GG、TT两种基因型的3`增强子对EPO基因启动子效率有差异性。