磁性纳米粒子的表面功能化及其在蛋白固定中的应用

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本论文就Fe3O4磁性纳米粒子的制备及其表面功能化,以及其在蛋白固定中的应用开展了相关工作。采用共沉淀法合成了表面富含有羟基的大小约15nm、分布均匀的类似球形的Fe3O4磁性纳米粒子,但其有团聚现象,在水溶液中不稳定。用柠檬酸钠对制备好的Fe3O4粒子进行表面修饰,所制备的Fe3O4-CA磁性纳米粒子表面富含羧基,在水中具有良好的分散稳定性。本文使用分散聚合法制备了Fe3O4@(PS-co-PAA)磁性高分子微球,其磁含量为17%,通过磁筛选可以获得磁性优良的Fe3O4@(PS-co-PAA)磁性高分子微球,但所制备的磁性微球在水中的分散稳定性欠佳,限制了其进一步应用。采用碳二亚胺法制备了Fe3O4-CA-PEI磁性粒子,并对其制备条件进行了优化。引入紫外吸光度的模的概念来表征其在水溶液中的分散稳定性和磁响应性。分别考察了Fe3O4-CA磁性粒子的使用量,PEI的使用量,PEI的分子量,封闭试剂的使用等因素对Fe3O4-CA-PEI磁性性能的影响。结果表明在摇床振摇下分次加入磁性粒子,并在反应结束后用PEI进行封闭,可以明显改善粒子的粒径分布;随着PEI分子量的减小,所制备的Fe3O4-CA-PEI磁性粒子的粒径逐渐减小,与医用磁性粒子相比,分子量为1800的PEI制备的Fe3O4-CA-PEI磁性粒子具有较好的分散稳定性和磁响应性。透射电镜显示,所制备的Fe3O4-CA-PEI磁性粒子形态各异,大小在几百到几十纳米不等,与医用磁性粒子类似;热失重曲线显示,Fe3O4-CA-PEI磁性粒子中Fe304的含量高达91.87%。使用Fe3O4-CA-PEI-PAA-NHS磁性粒子为固定载体,以BSA为模蛋白,考察了Fe3O4-CA-PEI-PAA-NHS磁性粒子对BSA的固定作用,实验得出最佳的固定时间为60min,并计算出BSA的最大固载量为1908mg/g。在此基础上,对抗体进行了固定,实验表明,抗体被成功的固定在磁性粒子上,实验制备的磁性粒子有望用于免疫分析。
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