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鹿茸入药历史悠久,是治疗肾阳虚的常用药材。药典记载,鹿茸具有壮肾阳、强筋骨及益精血等功效。药理实验证明,鹿茸水提物对铂类药物诱导的肾毒性具有一定的改善作用,但药物的肾毒性机制及作用途径不同,且鹿茸对GM肾毒性的影响尚未见报道。庆大霉素（GM）为氨基糖苷类抗生素针对革兰氏阴性菌具有良好的药效,GM因价格优廉、抗菌谱广等特点,在临床上曾被广泛应用,但因其肾毒性而在临床应用上受到限制。因此,寻找预防或减轻GM肾毒性的天然辅助性药物已成为研究热点。本文探讨花鹿茸水提物中对GM诱导的肾损伤起保护作用的有效成分及其保护机制。采用超声波辅助溶剂法和水提醇沉法分别提取梅花鹿二杠茸中总蛋白（SDAPR）和总多糖（SDAPO）成分,通过Braford法和苯酚硫酸法分别对其进行纯度测定。实验结果SDAPR的纯度为92.60%,多糖含量≤5.00%;SDAPO纯度为91.30%。研究花鹿茸中水溶性成分减轻GM诱导的人胚肾293（HEK293）细胞毒性的影响。建立体外GM诱导HEK293细胞毒性模型。采用MTT法进行GM对HEK293细胞毒性测定、SDAPR和SDAPO对HEK293细胞增殖测定、SDAPR和SDAPO减轻GM诱导细胞损伤的活性筛选。使用生化试剂盒分别测定HEK293细胞培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）含量、细胞裂解液中谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性。同时,运用光学显微镜观察细胞形态变化。结果表明,GM显著抑制HEK293细胞活力且呈剂量依赖性,半数抑制浓度(IC50)为3.00 mg·mL-1（P<0.01）,SDAPR(0.50-4.50 mg·mL-1)对HEK293细胞有显著的细胞增殖作用（P<0.01）且无细胞毒性,然而SDAPO(0.50-4.50 mg·mL-1)对HEK293细胞无显著增殖作用（P>0.05）。SDAPR(1.00,2.00,4.00 mg·mL-1)预给药改善GM致HEK293细胞活力下降现象,由细胞死亡量较多,漂浮且形态皱缩转变为细胞形态逐渐恢复正常,细胞呈正常的梭型形态且细胞数量明显增多,同时SDAPR预给药还缓解GM诱导的HEK293细胞中GSH含量和SOD活性的降低,及MDA含量和LDH释放量的升高（P<0.01）。SDAPR能够减轻GM诱导的HEK293细胞毒性,其机制可能与促进细胞增殖和减轻氧化应激反应相关。研究SDAPR拮抗GM诱导HEK293细胞凋亡。建立体外GM诱导细胞损伤及凋亡模型,研究SDAPR对细胞凋亡的影响。采用ELISA法测定早期急性肾损伤指标,如:中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）,胱抑素-C（Cys-C）和肾损伤分子1（KIM-1）水平。使用JC-10线粒体膜电位试剂盒测定HEK293细胞中线粒体膜电位ΔΨm（MMP）。通过Hoechst33258荧光染色、流式细胞术及Western蛋白印迹分析的技术分别检测HEK293细胞的核形态、细胞凋亡率和细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达情况。结果显示,与正常对照组相比,GM组细胞中NGAL、Cys-C和KIM-1含量及促凋亡蛋白Bax表达和细胞凋亡率显著上升（P<0.05,P<0.01）,且细胞核收缩、染色质浓缩呈现凋亡小体,细胞中线粒体膜电位ΔΨm和抗凋亡蛋白Bcl-2表达显著下降（P<0.01）;经SDAPR给药后,细胞中NGAL、Cys-C和KIM-1含量及促凋亡蛋白Bax表达和细胞凋亡率显著下降（P<0.05,P<0.01）,且细胞核蓝色荧光强度降低,细胞核碎片和凋亡小体的数量明显减少,线粒体膜电位ΔΨm和抗凋亡蛋白Bcl-2表达显著升高（P<0.01）。SDAPR能够保护HEK293细胞免受GM所诱导的细胞损伤,这可能与花鹿茸总蛋白拮抗细胞凋亡反应有关。研究SDAPR对GM诱导的小鼠肾毒性的影响。建立体内GM诱导ICR小鼠肾毒性模型,记录小鼠体质量和肾质量,计算肾指数;以生化试剂盒方法分别检测小鼠血清中血尿素氮（BUN）和肌酐（Cr）的水平,肾组织中过氧化氢酶（CAT）和SOD活性、MDA和GSH含量;ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）水平;H&E染色观察肾组织病理变化。结果表明,SDAPR（50,100,200 mg/kg）显著抑制GM（100 mg/kg）诱导的小鼠肾指数、BUN、Cr、MDA、TNF-α和IL-6水平的升高（P<0.05,P<0.01）,以及SOD,CAT和GSH水平的降低（P<0.05,P<0.01）,并改善肾组织病理变化。SDAPR可有效减轻GM诱导的小鼠肾损伤,其机制可能与抑制氧化应激和炎症反应有关。结合体内外实验结果可知,SDAPR可有效减轻GM诱导的HEK293细胞毒性,保护HEK293细胞免受GM所诱导的细胞损伤及凋亡,其机制与促进细胞增殖、抑制氧化应激反应及拮抗细胞凋亡反应有关。同时,SDAPR还可减轻GM诱导的小鼠肾损伤,其机制与抑制氧化应激和炎症反应有关。系统研究SDAPR对氨基糖苷药物-GM诱导药物性肾损伤的影响,为传统中药花鹿茸的补肾作用机理研究提供基础理论依据。