中药肉豆蔻抗肿瘤活性部位筛选及体外抗肿瘤机制研究

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目前,肿瘤已经成为危害人类健康的重大疾病之一。由于发病率高、诊断困难、治疗手段有限及治疗效果差等因素,使恶性肿瘤的治疗成为了一个漫长的过程。外科手术治疗、放射治疗、化学药物治疗是恶性肿瘤的主要疗法。目前,化学药物治疗在三大疗法中占有重要的地位,但是其靶向性低、毒副作用大。中药来源广、价格低、毒副作用小,从中药中提取有效成分,并在此基础上研制抗肿瘤的新药已经成为当前药物研究的热点。本文主要进行了肉豆蔻粗提物的筛选,分别为石油醚部位、乙酸乙酯部位、乙醇部位和水部位。以MTT法测定不同细胞株对不同部位的增殖抑制活性,并对肉豆蔻有效活性部位的抗肿瘤机制进行了研究。本文选取了人肺癌细胞A-549、人宫颈癌细胞Hela、人肝癌细胞BEL-7402、人结肠癌细胞HCT-116和人结肠癌细胞系RKO五株癌细胞检测了活性部位的体外增殖抑制作用。MTT法结果显示,人肝癌细胞BEL-7402对乙酸乙酯部位显示出较好的细胞增殖抑制作用,其IC50值为36.07μg/mL。hoechst33258染色和基因组DNA检测发现,肉豆蔻的乙酸乙酯部位能够诱导人肝癌细胞BEL-7402凋亡。进一步研究发现,肉豆蔻的乙酸乙酯部位能引起BEL-7402细胞线粒体膜电位降低,诱导胞内ROS产生。Western印迹法检测发现,肉豆蔻的乙酸乙酯部位能促进BEL-7402细胞中细胞色素C从线粒体大量释放到胞质中,导致相关蛋白Bcl-2和Bax的表达,进而激活caspase-9/3,使细胞进入线粒体凋亡程序。综上所述,中药肉豆蔻作为一种低毒、安全且低价的抗肿瘤活性物质,有潜力成为一种抗肝癌新药物。
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