目的: 体外分离培养出生24h内SD乳鼠室管膜前下区（Anterior subventricularzone，SVZa）神经干细胞( Neural stem cells，NSCs)，通过基因转染等方法研究Dlx5（distall-less homeobox5）基因对SVZa NSCs向酪氨酸羟化酶（Tyrosine hydroxylase,TH）阳性细胞分化过程中的影响。　　方法: （1）构建一个重组腺病毒穿梭载体质粒pDC316-mCMV-EGFP-mDlx5及对照重组腺病毒包装；（2）利用细胞培养技术对SVZa NSCs进行分离培养及传代，用免疫荧光细胞化学方法鉴定其干细胞特性及分化潜能；（3）利用基因转染、RT-PCR等方法检测重组质粒在SVZa NSCs中的表达情况；（4）用荧光标记方法观察转染的神经干细胞分化后的形态特点及鉴定分化细胞的类型,以了解与神经元分化的关系；（5）转染Dlx5基因的SVZa NSCs分化后，用多巴胺（DA）能神经元特异性标记物即酪氨酸羟化酶（TH）免疫组化染色，以了解转染后的NSCs分化成TH阳性细胞的比例。　　结果: （1）成功构建重组腺病毒质粒pDC316-mCMV-EGFP-mDlx5，插入786bp片段与已知小鼠基因同源性为100％，没有开放阅读框的移位；（2）原代培养的SVZa神经细胞球nestin免疫荧光表达阳性，分化培养基诱导其分化后的神经细胞NSE、GFAP、CNP免疫荧光均表达阳性；（3）重组腺病毒载体质粒转染SVZa NSCs后，8h出现少量绿色荧光，16h开始增多，48h到高峰，并能够稳定表达较长时间；RT-PCR检测到转染24h后的神经细胞有外源转染基因的mRNA表达，说明构建的重组腺病毒载体质粒可以在SVZa NSCs中稳定表达；（4）基因转染后神经细胞按形态特征分两类：第1类细胞突起从胞体分别向两个相反方向伸长，形成两极，无或少分支；第2类是从胞体一端发出一条较长的突起，类似神经元的轴突，其他突起则细、短。通过NSE免疫荧光证实为神经元样细胞，TH染色证实能够分化成TH阳性细胞；（5）常规传代培养诱导分化后，实验组和对照组均有TH阳性细胞出现，比率分别为实验组（34.20±0.14）%,对照组：（11.28±0.81）%，其分化成TH阳性细胞比率比较，有统计学意义（P<0.05）。　　结论: 1.体外成功分离、培养并鉴定新生24h内SD乳鼠SVZa NSCs；2.成功构建重组腺病毒穿梭载体质粒（AD-Dlx5）且Dlx5基因能在NSCs中稳定表达；3.Dlx5基因与SVZa NSCs的分化联系紧密，能够促进体外培养的SVZa NSCs向TH阳性细胞分化。