基于物理包裹作用制备肿瘤穿透肽修饰PGG-PTX递药系统的研究

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近几年我国的肿瘤新生发病率持续上升,我国癌症新发癌症病例占世界的1/4,在众多癌症类型中,胶质母细胞瘤具有发病率高,难治愈,易复发,患者生存周期短,生活质量差等特点。面对如此严峻的形势,科研工作者需要制备并研发出新型抗肿瘤靶向纳米递药系统用于癌症的治疗。人们通常用化学连接的方法将多肽等靶向配体修饰在不同纳米材料表面,形成抗肿瘤靶向纳米递药系统。但往往涉及到化学反应,就要考虑到反应条件,步骤是否繁琐,以及所用基团是否可用,产物纯度,反应过程越多产量越低等问题。我们改变这种常用的靶向修饰方式,减少反应步骤,将纳米递药系统的制备模块化,将具有不同功能的模块化元件通过物理相互作用进行组装,避开化学合成的繁琐,使得纳米递药系统的制备更加便捷可控。首先制备功能性靶向元件,再通过物理包裹作用制备肿瘤穿透肽修饰的PGG-PTX递药系统。该系统包含RGERPPR多肽修饰的靶向元件,高分子聚合物及抗肿瘤药物,此中靶向元件为二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇3400-RGERPPR(DSPE-PEG3400-RGERPPR);高分子聚合物(PGG)为聚谷氨酸骨架及骨架上的谷氨酸支链;抗肿瘤药物为紫杉醇(PTX);聚谷氨酸高分子骨架和谷氨酸支链通过肽键连接,在谷氨酸支链末端与抗肿瘤药物PTX通过酯键键合,形成PGG-PTX。然后PTX与靶向元件中的DSPE通过疏水相互作用,使靶向元件疏水端DSPE包裹进入PGG-PTX中,通过物理包裹作用形成聚合物-药物纳米递药系统,用于肿瘤靶向递药。通过动态蒸发光散射仪、高效液相色谱仪、流式细胞仪、透射电镜等仪器和方法对RGE-PEG-DSPE/PGG-PTX纳米递药系统进行了一系列表征。试验结果显示:粒径在100 nm左右,呈球形,分散性良好;在PBS中长期保存稳定性良好;药物释放缓慢;细胞摄取试验中通过定性定量试验可以看出肿瘤细胞和血管内皮细胞均对该递药系统的摄取明显增多,该递药系统对胶质母细胞瘤的靶向能力较好;体外抗神经胶质瘤活性评价中该递药系统显著增强了胶束纳米药物对神经胶质瘤的体外生长抑制作用;通过静脉注射给药,利用肿瘤EPR效应和RGERPPR介导作用将其靶向至肿瘤部位,此递药系统可用作肿瘤治疗药物的靶向递送,且在治疗脑胶质瘤上获得了良好的疗效,延长了 BALB/C脑胶质瘤裸鼠的中位生存期,改善了荷瘤裸鼠的生存状况。此递药系统可在RGERPPR的介导作用下用于胶质母细胞瘤的靶向治疗。为靶向纳米药物的构建提供了新的思路和方法,同时为胶质母细胞瘤的靶向治疗提供实验基础。因此本研究拥有重要的临床现实意义和市场应用价值,拥有良好的应用前景。
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