中俄部分边境地区蜱媒病毒调查

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蜱媒病毒(Tick-borneviruses,TBV)属于一大类重要的虫媒病毒,通过脊椎动物和媒介蜱在自然界中循环。目前已知的蜱媒病毒有160多种,其中一些对人类和动物健康构成严重威胁。中国和俄罗斯边境接壤区域内存在蜱媒病毒的自然疫源地。随着“一带一路”倡议的提出,中俄边境口岸的贸易、运输和旅行日益增多,蜱媒疾病跨境传播的风险加大。因此本研究对中俄部分边境地区开展蜱媒病毒的调查,为该地区蜱媒疾病的监测和防控提供病原学依据。本研究(1)于2019-2020年4-5月在中俄边境5个市区(延边朝鲜族自治州、松龄区、加格达奇区、伊春市及佳木斯市),采用人工布旗法和家畜体表摘取法采集蜱标本,对蜱进行形态学鉴定,并按采集地区、时间、种属、数量进行统计分析;(2)建立西藏环状病毒TaqMan反转录聚合酶链式反应(Reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)的快速检测方法。利用实时荧光定量RT-PCR方法,对采集的蜱标本开展针对发热伴血小板减少综合征病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)、蜱传脑炎病毒(Tick-borneencephalitisvirus,TBEV)、阿龙山病毒(Alongshanvirus,ALSV)、鄂木斯克出血热病毒(Omsk Hemorrhagic Fever virus,OHFV)、兰格特病毒(Langatvirus,LGTV)、波瓦生病毒(Powassanvirus,POWV)、西藏环状病毒(Tibetorbivirus,TIBOV)核酸分子检测;(3)针对上述筛查呈核酸阳性的标本,使用高通量测序测定病毒基因组,进行遗传进化分析和氨基酸特征性位点选择压力分析,并对远东亚型TBEV起源时间和传播路径进行分析。研究结果显示:(1)2019-2020年在中俄边境的5个市区共采集蜱标本7171只,隶属于1科3属3种。全沟硬蜱(Ixodespersulcatus)为优势蜱种,占45.13%,其次是森林革蜱(D.silvarum)占 27.96%,嗜群血蜱(H.concinna)占 26.91%;(2)蜱标本中检测出4批TBEV核酸阳性,均由全沟硬蜱携带,3批采集自大兴安岭松岭区,松岭区批阳性率为4.16%(3/72),1批采集自佳木斯市,佳木斯市TBEV批阳性率为1.11%(1/90)。检出4批ALSV核酸阳性,由全沟硬蜱和嗜群血蜱携带,2批采集自大兴安岭松岭区,2批采集自伊春市。SFTSV、POWV、LGTV、OHFV、TIBOV核酸检测均为阴性。建立的西藏环状病毒TaqMan RT-PCR检测方法,灵敏度高,特异性强;(3)共获得4条TBEV基因组序列,系统进化分析显示4条TBEV均为远东亚型。选择压力分析结果显示,远东亚型TEBV NS5基因区831位点受正选择压力。贝叶斯系统发育分析显示,TBEV远东亚型主要流行于俄罗斯远东地区、日本和我国的新疆维吾尔自治区、吉林省及黑龙江省。远东型TBEV起源于俄罗斯。共同祖先(tMRCA)时间出现为1152年(95%置信区间为721-1751),远东型TBEV可划分为两大分支,从共同祖先独立进化而来,中国分离株主要位于第二大分支。结论:远东亚型蜱传脑炎病毒是我国中俄部分边境地区最主要的蜱媒病毒。在大兴安岭松岭区和伊春市发现了与人类发热相关的阿龙山病毒(ALSV)。未检出发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)核酸阳性,未发现鄂木斯克出血热病毒(OHFV)、兰格特病毒(LGTV)、波瓦生病毒(POWV)、西藏环状病毒(TIBOV)在中俄边境流行证据。本次调查对中俄部分边境地区蜱媒疾病的防控提供了基础数据。
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