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胶质瘤是颅内最常见的恶性肿瘤，具有发病率、复发率、死亡率高，治愈率低等特点。虽然各种现代技术迅速发展，胶质瘤的诊断和治疗取得了一定进步，但是生存期、生活质量等指标仍无突破性进展，因此探索一种新的、有效的治疗方法显得尤为重要。目前基因治疗被认为是最具有应用前景的治疗手段之一，而选择合适的靶基因是基因治疗的关键。环指蛋白RNF138为含有RING finger结构的蛋白家族成员，该家族蛋白与锌指蛋白家族类似，通过蛋白‐蛋白、蛋白‐DNA相互作用，参与许多生理功能的调节及肿瘤的发生。目前国内外关于RNF138在恶性胶质瘤中的表达及功能研究尚少，因此本研究拟通过PCR、Western blot、免疫组化技术检测RNF138在人脑胶质瘤中的表达及通过慢病毒（Lentivirus）介导的siRNA工具感染恶性胶质瘤细胞U251对其功能进行体外研究。本课题从两个方面对RNF138进行研究：①通过PCR、Western blot、免疫组化方法分别检测其在胶质瘤细胞株及胶质瘤组织中的表达。②通过Lentivirus介导的siRNA工具感染恶性胶质瘤细胞株U251，体外观察敲减RNF138基因后对U251细胞增殖、凋亡以及细胞周期的影响。目的检测RNF138在五株胶质瘤细胞株SHG44、U87、U251、A172、U373及人脑胶质瘤组织中的表达情况，为进一步探讨RNF138在恶性胶质瘤细胞中的生物学功能奠定基础。方法采用半定量PCR、细胞免疫荧光方法分别检测SHG44、U87、U251、A172、U373等5株胶质瘤细胞株中RNF138mRNA、蛋白水平的表达；实时定量PCR、Westernblot、免疫组化分别检测35例人脑胶质瘤肿瘤标本（I级4例，II级13例,III级11例，IV级7例）及8例非瘤脑组织标本中RNF138mRNA、蛋白水平的表达。结果半定量PCR方法从SHG44、U87、U251、A172、U373五株胶质瘤细胞株中扩增出144bp大小的目的片段；细胞免疫荧光证实该五株细胞株中均有RNF138蛋白的表达。实时定量PCR结果提示RNF138mRNA在人脑胶质瘤各级别组中的表达均高于非瘤脑组织，差异具有统计学意义。Western blot提示各级别脑胶质瘤标本中均有RNF138蛋白表达，非瘤脑组织表达很低。免疫组化结果示各级别脑胶质瘤标本中均有RNF138蛋白表达，与非瘤脑组织表达相比差异具有统计学意义，且高级别胶质瘤阳性率高于低级别胶质瘤，两者差异具有统计学意义。结论RNF138基因高表达于人脑胶质瘤，且与胶质瘤恶性度相关。目的体外研究下调RNF138基因对恶性胶质瘤细胞株U251细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响，初步阐明RNF138基因在恶性胶质瘤细胞株U251中的生物学功能。方法构建Lentivirus介导的干扰RNF138基因的siRNA工具，用其感染胶质瘤细胞株U251，设立阴性干扰对照组，荧光显微镜观察转染效率；实时荧光定量PCR检测敲减效率；运用Cellomics仪器连续检测RNF138基因敲减后U251体外增殖情况；流式细胞仪检测U251凋亡及细胞周期变化情况。结果慢病毒载体高效、稳定转染U251细胞，靶向RNF138的siRNA有效抑制RNF138基因表达，使RNF138mRNA表达减少60%，U251体外增殖明显减缓，凋亡明显增加，细胞阻滞在G2/M期。结论RNA干扰抑制RNF138基因表达可以明显抑制胶质瘤细胞株U251体外增殖，促进其凋亡，影响细胞周期，阻滞细胞分裂。RNF138基因可能在调控胶质瘤细胞增殖、凋亡、细胞周期方面起重要作用。