目的 子宫内膜癌是女性常见的恶性肿瘤之一，其发病率排序位于乳腺癌、肺癌、大肠癌之后列第四位，在我国占女性生殖系统恶性肿瘤的20％-30％，列第二位。子宫内膜癌的发病率和地域关系很大，不同地域的发病率有明显的差异，世界范围而言以北美、北欧地区为高，亚洲、中南美地区相对较底。近20年来子宫内膜癌发病年龄有提前的趋势，而发病率呈上升的趋势。近年来对于子宫内膜癌的基础和临床研究也有了较大的进展，在子宫内膜癌的分子生物学研究方面侧于基因改变、生长调节等内容。共济失调性毛细血管扩张症变异基因(Ataxia Telangiectasia Mutated Gene，ATM基因)是一种罕见的常染色体隐性遗传疾病—共济失调性毛细血管扩张症(ataxia telangectasia，A-T)的致病基因。A-T综合征的主要特征是进行性小脑性共济失调和颜面部毛细血管扩张，具有不同程度的放射敏感性，伴有免疫系统缺陷，同时具有较强的肿瘤易感性。本课题选择了ATM基因进行研究，以期探明子宫内膜癌患者的ATM基因的变异情况。分离鉴定子宫内膜癌相关基因可能从根本上阐明子宫内膜癌的发生机制，并可能导致有效的早期预防和遏制子宫内膜癌发生发展的策略的产生。方法 迄今为止，在A-T患者中已发现300多个基因突变，在非A-T患者的各种肿瘤患者和细胞系中发现100多个突变，突变类型以碱基替代、小片段的缺失、插入为主。这些突变分布于ATM基因整个编码区，每个外显子都存在基因变异位点，没有发现明显的突变热点。由于ATM无论从基因组结构、还是蛋白分子量来看均较庞大，对其全基因组进行突变筛查要耗费巨大的人力和财力，因此我们挑选ATM基因数据库中及文献报导中突变频率较高的10个外显子(外显子8，12，17，23，33，38，41，51，60，65)进行研究。变性高效液相色谱(denaturehigh performance liquid chromatography，DHPLC)是一种新的敏感的高效的突变检测方法，已成功地运用于很多疾病相关基因的突变筛查。针对ATM这样基因组庞大的基因，及其在肿瘤的主要突变方式，DHPLC不失为一种较好的突变检测策珞。我们采用DHPLC技术对30例子宫内膜癌组织标本的ATM基因进行突郑州大学2004年硕士研究生论文子宫内膜癌户门，M基因突变及其生物学意义变筛查，经DNA测序，以期初步明确ArM基因在子宫内膜癌中的突变频率和突变方式。实验材料子宫内膜癌组织标本30例取自河南蹼阳市人民医院、中原油田职工总医院妇产科近3年来经手术切取的子宫内膜癌新鲜组织标本.实验方法包括子宫内膜癌组织DNA制备、RNA制备、蛋白质制备、PCR扩增、DHPLC分析、DNA直接测序等步骤。呈乳在本研究中，我们筛查了30例子宫内膜癌组织中户JM基因的10个外显子和两个cDNA片段的突变情况，这些引物涵盖了整个灯M基因的大约18个外显子。DHPLC分析显示30例子宫内膜癌组织标本中检出3例标本存在八TM基因变异(10%)。DHPLC检测出的阳性标本通过DNA测序来确定突变的位点及类型，测序结果与GeneBank中的ATM序列HSU33841比较。DNA测序证实这些变异中除一个为单碱基的缺失外，其余均为碱基替代，包括转换和颠换两种方式。其一突变位点为8684G一G/A转换，这一位点的突变导致2832Aig一His，由于该位点位于ATM的高度保守的PI3激酶活性区，推测这一突变可能会影响灯M蛋白的功能。另一突变位点为9389C一G。结论子宫内膜癌中存在ArM基因突变，该基因的突变可能增加子宫内膜癌发生的可能性。