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乳铁蛋白是一种分子质量约80kD的铁结合性糖蛋白,隶属于转铁蛋白家族,具有广泛的生物学和生理特性的功能。本课题的研究目的包括两个方面:其一是机体免疫低下状态下,乳铁蛋白及其胃蛋白酶水解产物对外周血中Th1/Th2细胞平衡的影响;其二是乳铁蛋白对食物过敏机体外周血中Th1/Th2细胞平衡的影响。对BALB/c小鼠一次性腹腔注射80mg/kg·body weight(BW)的环磷酰胺,建立免疫低下小鼠模型,检测其脾脏指数、胸腺指数和外周血部分细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10、IL-12p40、 IFN-γ、 TGF-β)等相关指标。对免疫低下小鼠灌胃不同剂量(2、20、200mg/kg·BW)的乳铁蛋白及其水解产物,在不同时间点检测外周血中IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4比值的变化,评价其对Th1/Th2细胞平衡的影响。实验结果表明,小鼠在第3天达到了免疫最低下状态,且Th1/Th2细胞平衡偏向了Th2细胞。20mg/kg·BW的乳铁蛋白及2mg/kg·BW的乳铁蛋白水解产物在前2小时明显提高了IFN-γ含量及IFN-γ/IL-4比值。乳铁蛋白对IL-4的影响较小(P>0.05),而其水解产物只在第3小时显著降低了IL-4的含量(P≤0.05)。因此,乳铁蛋白及其胃蛋白酶水解产物对环磷酰胺诱发免疫低下小鼠具有重要的免疫调节作用,改善了Th1/Th2细胞平衡,并且对Th1细胞的影响更明显。利用卵清白蛋白(Ovalbumin, OVA)建立BALB/c小鼠食物过敏模型,观察乳铁蛋白对该食物过敏机体的免疫调节作用。食物过敏小鼠分别接受预防性乳铁蛋白处理和胃肠道刺激期间灌胃乳铁蛋白,最后一次处理1h后检测其外周血中IFN-γ、IL-4、TGF-β、IL-6、IL-10、IL-12p40和特异性IgE的变化,进而评价乳铁蛋白对Th1/Th2细胞平衡的影响。结果表明,2mg/kg·BW的乳铁蛋白在胃肠道刺激期间显著提高了IFN-γ和IL-12p40水平,而降低了IL-4和IL-6水平,但20mg/kg·BW的乳铁蛋白降低了所有这些细胞因子(IFN-γ含量从197.8ng/L降到162.15ng/L;IL-4含量从216.45ng/L降到148.65ng/L;IL-10含量从181.2ng/L降到151.2ng/L;TGF-β含量从221.3ng/L降到162.15ng/L;IL-12p40含量从221.2pg/L降到186.4pg/L;IL-6含量从99.6ng/L降到88.55ng/L)。同时,乳铁蛋白明显降低了血清中特异性IgE浓度而提高了IFN-γ/IL-4比值,20mg/kg·BW的乳铁蛋白对IgE影响较大(含量从4.5μg/L降到4.0μg/L),2mg/kg·BW的乳铁蛋白对IFN-γ/IL-4比值影响较大(比值从0.8升到1.2)。此外,预防性处理中的乳铁蛋白均显著降低了IL-4、IL-6、IL-10、IL-12p40、IFN-γ、TGF-β和IgE水平,明显提高了IFN-γ/IL-4比值,并且20mg/kg·BW的乳铁蛋白效果较好。因此,乳铁蛋白能够改善OVA诱导的食物过敏小鼠Th1/Th2细胞的平衡,具有重要的免疫调节作用。