臭氧治疗鼠骨性关节炎滑膜中TWEAK/Fn14mRNA、IL-1β、TNF-α表达的影响

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目的:1.明确TWEAK/Fn14是否参与了骨性关节炎发生发展。2.观察臭氧治疗后,大鼠关节滑膜的TWEAK/Fn14表达变化,进一步探讨臭氧治疗骨性关节炎的机制。  方法:将只32只成年SD大鼠随机分为4组,即正常组、模型组,TWEAK抗体组及臭氧组,每组8只。模型组、TWEAK抗体组、臭氧组均采用4%木瓜蛋白酶左膝关节腔注射建立大鼠膝关节骨性关节炎模型。TWEAK抗体组在造模前1小时经鼠尾静脉注射TWEAK抗体进行干预。造模成功后,予40μg/ml臭氧0.1ml注入臭氧组鼠的左膝关节腔内,每周一次,连续两周。检测指标1.关节滑膜标本进行HE染色于光镜下观察病理变化;2.用免疫组化法检测IL-1β,TNF-α在滑膜中的表达;3.关节滑膜行实时荧光定量PCR检测TWEAK和Fnl4的表达情况。  结果:1.滑膜组织HE染色:正常组:滑膜上皮细胞为单层、扁平样分布,未见明显血管扩张充血,滑膜组织正常增生,未见明显滑膜组织水肿、变性和坏死,无明显的炎性细胞浸润及炎性肉芽组织增生等病理性改变。模型组:滑膜上皮细胞表现为增生明显,细胞层次明显增多,排列不均,可见部分滑膜组织结构破坏,出现组织水肿、变性及坏死,部分区域伴有血管扩张充血,部分区域甚至出现炎性肉芽组织及纤维组织增生。TWEAK抗体组:滑膜上皮出现局部增生,细胞层次增多。臭氧组:滑膜细胞排列接近正常组,滑膜组织轻度水肿,不伴血管扩张、充血,少量细胞增生。2.免疫组化IL-1β的表达:与正常组相比,模型组细胞阳性率显著增加,差异有统计学意义(p<0.05);与模型组相比,臭氧组细胞阳性率显著降低,差异有统计学意义(p<0.05);与模型组相比,TWEAK抗体组细胞阳性率显著降低,差异有统计学意义(p<0.05)。臭氧组及TWEAK抗体组比较阳性率比较无统计学差异(p﹥0.05)。3.免疫组化TNF-α的表达:与正常组相比,模型组细胞阳性率显著增加,差异有统计学意义(p<0.05);与模型组相比,臭氧治疗组细胞阳性率显著降低,差异有统计学意义(p<0.05);与模型组相比,TWEAK抗体组细胞阳性率显著降低,差异有统计学意义(p<0.05)。臭氧组及TWEAK抗体组比较阳性率比较无统计学差异(p﹥0.05)。4.实时荧光定量PCR检测滑膜中TWEAK和Fnl4的表达:与正常组比较,模型组、TWEAK抗体组及臭氧组滑膜TWEAK/Fn14的表达明显增高,差异有统计学意义(p<0.05)。与模型组比较,TWEAK抗体组及臭氧组滑膜TWEAK/Fn14的表达明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。TWEAK抗体组及臭氧组滑膜TWEAK/Fn14的表达比较差异无统计学意义(p﹥0.05)  结论:1. TWEAK/Fn14参与了OA的发生。可能是OA形成的机制之一。2.臭氧可能通过抑制下游炎性因子从而影响TWEAK/Fn14mRNA表达。
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