天然产物因其骨架结构类型丰富、生物活性广泛,成为了发掘新药先导化合物的重要源泉。然而,其成分复杂、结构多样和活性成分含量低的特点,导致天然产物中的药效物质基础研究面临着巨大的挑战。亲和色谱利用生物配基与其配体之间的特异性亲和作用,无需经过单体化合物的分离收集,就能够直接对天然产物提取物进行活性成分筛选,这为天然活性成分的高通量筛选提供了有效途径。近年兴起的有机聚合物整体材料具备制备简单、表面易修饰、比表面积大、生物相容性佳、易于实现微型化等优势,有望成为重要的亲和色谱载体。为了进一步构建合理、高效的亲和整体色谱筛选模型,本文以有机聚合毛细管整体材料为亲和色谱载体,制备了两种不同生物配基的毛细管亲和整体柱,通过与HPLC-MS结合应用于天然产物中活性成分的筛选。第一章,前言概述。首先系统地介绍了亲和色谱固定相种类及其近年来在天然产物活性成分筛选中的应用研究进展;然后对亲和色谱筛选与其他分析技术的联合进行了系统的阐述;此外还概述了亲和色谱中常用色谱材料种类及其应用;在此基础之上,提出了本论文的研究思路,并归纳了创新之处。第二章,系统考察了胰蛋白酶反应器的制备条件。首先以甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)为功能单体、聚(乙二醇)二丙烯酸酯(PEGDA)为交联剂、十二醇和正丙醇为生孔剂、偶氮二异丁腈为引发剂,经热引发毛细管原位聚合反应制备poly(GMA-co-PEGDA)整体材料;然后,利用GMA的开环反应,直接将胰蛋白酶修饰到材料表面得到胰蛋白酶反应器。本章对整体材料载体的制备条件和酶的固定化条件进行了系统优化;并对胰蛋白酶反应器进行了理化性质表征及性能评估,其结果表明所制备的胰蛋白酶反应器具有良好的理化特性及酶解活性。第三章,将胰蛋白酶反应器应用于天然产物中胰蛋白酶抑制剂的筛选。首先考察了上述胰蛋白酶反应器的动力学参数以表征其配体亲和力,并将其应用于15种黄酮单体化合物库中的酶抑制剂筛选,结果表明漆黄素、儿茶素、杨梅素等12种化合物具有不同程度的胰蛋白酶抑制活性;然后将胰蛋白酶反应器作为亲和萃取柱,结合HPLC-MS技术构建了胰蛋白酶亲和筛选模型,并应用于黄芩提取物中的胰蛋白酶抑制剂筛选,最终筛选到3种具有胰蛋白酶活性抑制成分,野黄芩苷、黄芩苷和汉黄芩苷。结果表明所构建的胰蛋白酶亲和筛选模型可用于天然产物中活性成分的筛选。第四章,以poly(GMA-co-PEGDA)整体材料作为载体,细菌群感系统关键受体LasR蛋白为配基,通过氨基固定化和羧基固定化两种方法制备了LasR蛋白亲和整体柱。采用红外光谱、荧光显微镜和扫描电镜等手段对LasR蛋白的固定化结果进行表征;并通过对LasR蛋白的配体亲和性考察,比较了两种固定化方法对LasR蛋白配体亲和能力的影响,最终确证羧基固定化法为LasR蛋白整体柱的有效制备方法,为其后续应用于天然产物筛选奠定了基础。第五章,对本论文的研究结果进行系统总结,并在此基础上对后续研究工作进行了展望。