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目的:研究二甲双胍联合重组人白细胞介素-6(Human recombinant IL-6)经JAK/SATA3信号通路对宫颈癌Hela细胞上皮-间质转化的抑制作用,并分析其机制。方法:1.体外37℃、5%CO2饱和湿度条件下培养宫颈癌Hela细胞;2.不同浓度的IL-6、二甲双胍在不同时间点处理Hela细胞,通过CCK-8法筛选出IL-6、二甲双胍的最佳作用浓度及时间;3.将实验分为对照组、IL-6组、二甲双胍组及IL-6+二甲双胍组,用筛选出的IL-6、二甲双胍的作用浓度及及时间处理Hela细胞;4.倒置显微镜下观察各组细胞形态变化;5.AO/EB荧光双染色法观察各组细胞凋亡、坏死情况;6.Western Blot检测各组细胞p-STAT3蛋白、Twist蛋白及E-cadherin蛋白变化;7.RT-PCR检测各组细胞Twist mRNA、E-cadherin mRNA变化。结果:1.CCK-8结果表明IL-6及二甲双胍的最佳作用浓度分别为50ng/ml、10mmol/L,最佳作用时间为48h;2.观察发现对照组细胞表现出典型的上皮细胞特性,呈椭圆形,紧密排列;IL-6组细胞呈间质细胞表型改变,间隙明显增宽,细胞呈纺锤状和长梭形,排列散乱;二甲双胍组细胞形态圆形,细胞成团堆积,较多坏死细胞漂浮;il-6+二甲双胍组细胞形态圆形、长梭形,细胞核疏松,坏死细胞明显增多,成团漂浮;3.ao/eb荧光双染色发现对照组、il-6组只有少量细胞凋亡,二甲双胍组有较多细胞凋亡,而il-6+二甲双胍组几乎全为凋亡细胞,细胞成片漂浮。统计各组细胞凋亡、坏死率发现,il-6+二甲双胍组细胞凋亡、死亡率明显多于其他各组,差异有统计学意义(p<0.05);4.westernblot结果表明il-6组较对照组p-stat3蛋白(1.54±0.41vs1.00±0.00)、twist蛋白(1.61±0.08vs1.00±0.00)表达量明显增加、e-cadherin蛋白(0.63±0.02vs1.00±0.00)表达量下降,差异有统计学意义(p<0.05);二甲双胍组较对照组p-stat3蛋白(0.94±0.03vs1.0±0.00)、twist蛋白(0.97±0.03vs1.00±0.00)及e-cadherin蛋白(1.03±0.0242vs1.00±0.00)表达无明显升高或降低,差异无统计学意义(p>0.05);il-6+二甲双胍组较对照组p-stat3蛋白(0.56±0.06vs1.00±0.00)、twist蛋白(0.34±0.12vs1.00±0.00)、e-cadherin蛋白(0.44±0.01vs1.00±0.00)表达量明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。5.rt-pcr结果表明,il-6组twistmrna表达增加,e-cadherinmrna表达下降,较对照组有显著性差异(1.63±0.04vs1.00±0.00,0.56±0.06vs1.00±0.00;p<0.05);il-6+二甲双胍组twistmrna、e-cadherinmrna表达下降,较对照组有显著性差异(0.45±0.02vs1.00±0.00,0.26±0.10vs1.00±0.00;p<0.05);二甲双胍组twistmRNA、E-cadherin mRNA表达较对照组差异无显著性(0.94±0.06 VS1.00±0.00,1.05±0.34 VS 1.00±0.00;p>0.05)。结论:1、IL-6能诱导宫颈癌Hela细胞EMT;2、二甲双胍可能经JAK/STAT3信号通路抑制IL-6诱导的宫颈癌Hela细胞上皮-间质转化。