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目的：随着肿瘤发生的观念由细胞过度增殖扩展到细胞不死，诱导肿瘤细胞凋亡已成为肿瘤治疗的新方向及研究热点。涎腺多形性腺瘤是最常见的涎腺交界性肿瘤，有明显潜在恶性，具有“好种植，易复发”的特点，多次复发可导致癌变。本实验利用肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）与白细胞介素Ⅱ(Interleukin-2，IL-2）联合用药，在体外诱导涎腺多形性腺瘤细胞发生凋亡，研究TNF-α与IL-2联合诱导凋亡的时间及剂量效应，并探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的机理，为临床多形性腺瘤的治疗提供新思路及可靠的实验依据。材料与方法：1．材料：（1）细胞：人涎腺多形性腺瘤细胞传代培养，取呈对数生长的第12代细胞进行实验。（2）药品：重组人肿瘤坏死因子-α（rhTNF-α）、重组人白细胞介素Ⅱ（rhIL-2）。2．方法：多形性腺瘤细胞在RPMI1640培养液（含10%的胎牛血清）中，37℃恒温孵育。实验分两部分。第一部分：实验分四组：A组（1500U/ml rhTNF-α处理24h）、B组（1500U/ml rhTNF-α处理48h）、C组（1500U/ml rhTNF-α处理72h）、D组（3000U/ml rhTNF-α处理72h）。各相应对照组分别加入生理盐水作为溶剂对照。第二部分：E组（1500U/ml rhIL-2处理72h），相应对照组加入生理盐水作为溶剂对照。F1组（1500U/ml<WP=4>rhTNF-α联合500U/ml rhIL-2处理72h）、F2组（1500U/ml rhTNF-α联合1500U/ml rhIL-2处理72h）、F3组（1500U/ml rhTNF-α联合3000U/ml rhIL-2处理72h），其相应对照组（1500U/ml rhTNF-α处理72h）。分别计数各组细胞数目，并应用流式细胞术检测各组凋亡率及细胞周期的分布情况，利用光镜观察药物处理后的肿瘤细胞形态改变。结果：1．A组细胞总数为130.33±4.73×104个，其对照组为154.67±4.04×104个(P<0.01)；B组细胞总数为167.33±5.69×104个，其对照组为232.67±4.04×104个(P<0.01)；C组细胞总数为262.33±15.50×104个，其对照组为391.67±12.10×104个(P<0.01)；D组细胞总数为184.33±6.66×104个，其对照组为391.67±12.10×104个(P<0.01)。E组细胞总数为386.67±12.86×104个，其对照组为391.67±12.10×104个(P>0.05)。F对照组细胞总数为262.33±15.50×104个，F1组细胞总数为228.33±3.21×104个(P<0.01)；F2组细胞总数为193±5.57×104个(P<0.01)；F3组细胞总数为193±8.19×104个(P<0.01)。2．流式细胞术检测 A、B、C三个实验组均有特征性的凋亡峰形成。A组凋亡率为10.30±0.46%，其对照组为1.77±1.01% (P<0.01)；B组凋亡率为12.37±0.80%，其对照组为3.20±0.40% (P<0.01)；C组凋亡率为16.57±0.61%，其对照组为5.20±0.50% (P<0.01)。A、B、C三个实验组间有显著性差异 (P<0.01)。另外，随处理时间的不同，各组的细胞周期分布发生改变。D组凋亡率为9.20±0.36%，其对照组为5.20±0.50% (P<0.01)。同时，部分细胞对碘化丙啶染色剂通透性增加，表现为染色增强，提<WP=5>示部分细胞发生坏死。E组凋亡率为5.03±0.75%，其对照组为5.20±0.50% (P>0.05)。F对照组凋亡率为16.57±0.61%，F1组凋亡率为18.33±0.56% (P<0.01)；F2组凋亡率为29.10±0.85% (P<0.01)；F3组凋亡率为25.93±1.29% (P<0.01)。F1、F2、F3三个实验组间有显著性差异 (P<0.01)。3．TNF-α与IL-2联合诱导后多形性腺瘤细胞形态的改变：光镜观察发现大量多形性腺瘤细胞胞浆皱缩，胞核染色质固缩，呈大小不等的点状，表明凋亡的发生。结论：1．TNF-α可诱导体外涎腺多形性腺瘤细胞发生凋亡。2．IL-2可增强TNF-α诱导涎腺多形性腺瘤细胞凋亡的效能。 3．TNF-α与IL-2联合诱导多形性腺瘤细胞凋亡的效果有时间和剂量效应。