麝香保心丸是由麝香、人参、牛黄、肉桂、苏合香、蟾酥和冰片等七味药材组成的中药复方,具有芳香温通、益气强心之功效,主要用于治疗心肌缺血引起的心绞痛、胸闷及心肌梗死,是目前国内临床上广泛应用于治疗冠心病的特效复方药物。近年来,多篇文献报道麝香保心丸在治疗脑缺血性疾病方面有很好的效果,并有大量研究表明麝香保心丸具有改善微循环、降低脑血管阻力、增加脑血流量、改善脑缺血所致的脑组织损伤、缩小脑梗死体积、改善神经损伤症状的功能。本课题对麝香保心丸中保护神经损伤作用的活性成分及作用机制进行了研究。在前期血清药物化学研究基础上,本课题在细胞水平上对麝香保心丸中入血成分保护谷氨酸诱导PC12细胞损伤的活性进行了筛选。结果表明,在麝香保心丸的二十六种入血成分中,日蟾毒灵、麝香酮、肉桂醛具有显著的保护谷氨酸诱导PC12细胞损伤的作用,其中肉桂醛的效果最为显著。因此,本课题进一步对肉桂醛保护谷氨酸诱导PC12细胞损伤的体外药效进行研究,并对其作用机制进行了探讨。首先,本研究采用MTT法、流式细胞技术、Hoechst 33258染色法和酶活性的检测技术评价了肉桂醛保护谷氨酸诱导PC12细胞损伤的药效。结果显示,肉桂醛在5、10和20 gM浓度下均能有效的减少PC12细胞损伤,并呈现量效关系。其次,通过检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)水平、谷胱甘肽(GSH)水平和活性氧(ROS)含量评价肉桂醛保护PC12细胞受氧化应激损伤的药效。结果显示,不同剂量的肉桂醛均能显著地改变PC12细胞内MDA、GSH水平和SOD活力,以及减少ROS的含量。最后,通过检测线粒体膜电位、细胞色素C的释放、Caspase-9及Caspase-3的蛋白表达和Bcl-2家族蛋白的表达评价肉桂醛通过线粒体途径保护谷氨酸诱导PC12细胞损伤的作用。结果发现,5、10和20 gM浓度的肉桂醛均能使线粒体膜电位趋于稳定、线粒体内细胞色素C释放减少、Caspase-9和Caspase-3的蛋白表达量增加、抗凋亡蛋白Bcl-2表达量增加、促凋亡蛋白Bax表达量减少。本研究结果表明,肉桂醛能够有效地通过线粒体途径保护谷氨酸诱导PC12细胞的氧化应激损伤,提示肉桂醛可能是麝香保心丸治疗脑缺血性疾病造成的神经损伤的主要药效成分,并为麝香保心丸开发新的临床应用提供依据。