催产素诱导P19细胞分化为心肌细胞的实验研究

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目的:心肌梗死患者的干细胞移植治疗能够取代坏死的心肌细胞、增加有功能的心肌细胞数量,从而达到改善心功能的目的,是一种理想的治疗手段。目前,干细胞治疗还处于基础实验研究和初期的临床研究阶段,是全球心血管疾病研究者关注的焦点。P19胚胎癌细胞是目前研究较成熟的一种胚胎源性干细胞,深受广大干细胞研究者青睐。催产素(Oxytocin, OT)长期以来被认为只是一种女性生殖激素,然而,近年来随着其多方面作用的发现,逐渐被越来越多的研究人员所重视。近年的研究发现,OT还具有促进心脏发生的作用[1]。本实验应用OT作用于培养的P19胚胎源性干细胞,诱导其向心肌细胞方向分化,并通过免疫细胞化学技术、激光扫描共聚焦显微镜技术、透射电子显微镜技术等方法对诱导分化的细胞进行形态学观察,以期为心肌损伤干细胞治疗提供基础实验数据。方法:1 P19细胞诱导分化取对数生长期的P19细胞,经0.25%胰酶-0.2%EDTA消化,制成单细胞悬液。调整细胞密度为2×105/ml,以每皿2ml接种于0.5%琼脂铺底的直径35mm细菌级培养皿中悬浮培养。实验组1、2、3的培养基中分别含OT 1×10-7 mol/ L、3×10-7 mol/ L、5×10-7 mol/ L;对照组的培养基中不含OT。
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