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目的:检测结直肠癌组织及周边良性组织中DNA甲基转移酶3a和DNA甲基转移酶3b的基因表达水平,并研究基因表达水平差异与临床病理诊断的关系。 方法:将手术获得的20例标本,包括20例肿瘤组织和20例肿瘤边缘良性组织,以SYBR green染料为信号标记对手术中取得的样本进行分类;同时,对于获得的样本采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测结直肠癌组织以及癌旁正常结直肠组织中DNMT3a和DNMT3b mRNA的表达。根据已有的病例记录分析不同病人结(直)肠癌组织以及肿瘤边缘正常结(直)肠组织中两种DNA甲基化酶的转录、表达及其与肿瘤细胞病理学分期、患者肿瘤分级、以及患者基本信息(如年龄、性别等)之间的关系。 结果:结(直)肠癌组织中DNMT3a mRNA的表达平均值为0.033±0.005,癌旁正常结直肠组织中为0.029±0.005,差异并不具有统计学意义(P>0.05)。结直肠癌中DNMT3b mRNA的表达(2.912±1.174)明显高于癌旁正常结直肠组织(0.658±0.123),差异具有明显的统计学差异(P=0.023<0.05)。在肿瘤分级分别为I、II、III、IV的不同病人样本中,结直肠癌组织DNMT3b平均相对表达量在分别为3.254±0.652、3.303±0.553、3.433±0.658、3.487±0.357;说明,随着肿瘤的发展DNMT3b基因的表达量逐渐升高,但统计学分析表明,不同肿瘤分级之间DNA甲基化酶表达的差异并不显著(P>0.05)。结直肠癌组织中DNMT3b平均相对表达量在男性患者为3.447±0.423,在病人的基本情况比较中,在男性患者组织中DNMT3的相对表达量为3.447±0.423,而女性患者为3.082±0.301,统计学差异明显(P<0.05)。在患者周岁年龄的比较中,我们以40周岁作为区分标准,结果表明:40岁以上患者组织中DNMT3b的相对表达量平均值为3.413±0.391,而40岁以下患者为3.262±0.482,差异不具有统计学显著性(P>0.05)。因此,在患者的基本情况的比较中,性别因素对患者预后的影响更加显著。 结论:DNMT3b基因的表达水平在结直肠癌组织中的表达显著高于癌旁正常结直肠组织,提示DNMT引起的抑癌基因启动子区CpG岛的DNA甲基化修饰,可能是导致抑癌基因失活,以及肿瘤的发生和发展的重要原因之一。而在病人的基本情况方面,男性患者中DNMT3b基因的表达明显高于女性,这一现象提示我们:DNMT3b蛋白的表达水平可能受到性激素信号通路的影响,进而影响患者预后。除此之外,DNMT3a mRNA在结直肠癌组织中的表达无异于癌旁正常结直肠组织,故DNMT3a在结直肠癌的发生、发展中未起到直接作用。