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Kras基因是一种癌基因,在肿瘤中的突变率较高。它就像体内的一个“开关”,调控着肿瘤细胞生长和血管生成过程中的信号传导,影响着肿瘤的生长和扩散。Kras基因的检测能够为肿瘤的临床诊断,病情评估和预后判断以及基因的靶向治疗提供重要依据。因此,对组成Kras基因及其突变体的寡核苷酸分子进行定量检测,在癌症的诊疗方面具有重要意义。白细胞介素-8(IL-8)是白细胞介素家族中的一员,是具有多效性和重叠性的生物活性因子。IL-8能够调控血细胞的生长发育和分化成熟以及机体的免疫应答,同时与多种癌症有关。人源化的抗IL-8单克隆抗体已经应用于相关疾病的临床研究中。设计出快速高效的检测抗IL-8单克隆抗体的方法,将为各种炎症的治疗和肿瘤的研究提供有利条件。本文对三种新型荧光共振能量转移(FRET)体系进行了系统的研究,并将这些体系应用于核酸检测和免疫分析,定量检测了突变型Kras基因片段和生物素化的抗IL-8单克隆抗体本文第一章为绪论部分,该部分全面总结了FRET的原理,理论计算方法和荧光探针的研究进展,重点介绍了FRET体系在生物分析中的应用,对核酸检测,免疫分析,蛋白质相互作用等方面作了详细的叙述。本文第二章对表面活性剂CPB作用下的FRET体系进行了详细的研究。该体系通过阳离子表面活性剂对DNA的压缩作用来增强FRET信号,在不必分离过剩探针的情况下实现了长间距的供受体之间的FRET,并对含有30个碱基的靶DNA进行了定量检测。此外,利用圆二色谱法初步探讨了CPB与双链DNA的作用机理,对实验现象进行了合理解释。本文第三章对表面活性剂CTAB增敏的FRET体系进行了详细的研究。该体系通过阳离子表面活性剂与量子点和染料标记的二抗分子的相互作用来实现FRET,不必对抗体的特定区域进行标记或使用特殊的抗体片段。基于FRET导致的受体荧光峰面积的增加,对生物素化的IL-8的单克隆抗体实现了定量检测。本文第四章对DNA嵌入型染料JOJO-1作为供体的FRET体系进行了研究。研究发现,利用DNA嵌入染料JOJO-1作为供体构建FRET体系,不必对捕获DNA进行标记,而且可以有效降低空白中的假阳性,提高方法的选择性。基于FRET造成的受体荧光峰面积的增加,成功的对含有30个碱基的靶DNA进行了定量分析。本论文的主要特点：一、研究表面活性剂对FRET体系的影响,并利用静电相互作用,建立起两种新的定量检测长链核酸和抗体分子的方法。二、研究DNA嵌入型染料作为供体的FRET体系,建立了一种不必标记捕获探针,高信噪比,高选择性的核酸检测方法。三、上述研究工作为开创新的FRET体系,选择新型荧光探针提供了一定的理论和实践基础,在核酸,抗体等生物大分子的定量检测方面具有潜在的应用价值。