RNAi沉默PTTG基因对人胶质瘤细胞生物学行为的影响及其机制的研究

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胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,恶性程度高,早期诊断困难,根治机会较少,五年生存率低。研究显示,PTTG的高表达与多种肿瘤的发生、发展及侵袭进程密切相关,然而,它与胶质瘤发生发展的具体相关关系迄今尚不十分清楚。故本研究应用免疫组化法探讨了PTTG在胶质瘤组织中的表达与临床病理特征之间的关系,并进一步以多种体外培养的人胶质瘤细胞系—U87、U251及SHG-44细胞为对象,利用RNAi技术沉默其中PTTG基因的表达,观察其对人胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响并探讨其可能的作用机制。结果显示PTTG在人脑胶质瘤中表达升高,并与胶质瘤的病理分期、血管形成密切相关。所构建的RNAi表达质粒能够有效地转染胶质瘤细胞系并高效地沉默PTTG基因。RNAi沉默PTTG基因表达后,明显地改变了人胶质瘤细胞恶性生物学行为,表现为降低细胞增殖能力,诱导细胞凋亡的增加,明显降低细胞迁移速度及侵袭能力。首次发现RNAi沉默PTTG基因使细胞内质网扩张、细胞内钙储存增加,推测PTTG基因沉默影响了细胞内Ca2+信号系统,从而使胶质瘤细胞发生多种生物学行为的改变。首次发现RNAi沉默PTTG基因表达导致了Bcl-2家族蛋白的明显改变,结合caspase蛋白表达的变化,提示RNAi沉默PTTG基因表达引起的胶质瘤细胞凋亡与线粒体介导的细胞凋亡途径有关。本研究提示:针对PTTG基因表达产物的检测,将有助于对胶质瘤的恶性程度及侵袭性等做以辅助判断,指导胶质瘤的手术及进一步的治疗;RNAi技术可以作为沉默胶质瘤中PTTG基因的有效方法;而靶向PTTG的基因治疗,可能为胶质瘤的治疗提供新的策略。目前,国内外尚未见应用RNAi技术沉默PTTG基因对人胶质瘤进行抑制的相关报道。
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