视网膜DRD1激活对小鼠屈光发育的影响

来源 :温州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhuanzhiboke
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目的:  屈光不正是世界范围内最常见的眼部疾病和致盲的重要原因之一,其中近视的患病率在西方人群中已超过30%,在亚洲人则高达80%,同时近视相关眼部并发症也随之增多,如视网膜脱离、黄斑变性和青光眼等;近视患病率在近几十年里急剧上升,初步估计在以后十年内将有25亿人受到近视的威胁。作为视网膜上一种重要的神经递质—DA在近视的发生发展过程中起着重要作用,但其作用部位、机制和方式均未明确。本实验主要明确视网膜DRD1激活对小鼠屈光发育的影响,为进一步探索近视发生的机制,寻找预防和控制近视的手段提供新的思路和方法。  方法:  采用D1-Cre杂合子小鼠与C57BL/6小鼠交配,繁殖出所需的D1-Cre杂合子小鼠与同窝仔野生型小鼠。(1)D1-Cre杂合子小鼠和同窝仔野生型小鼠,在小鼠3周龄、5周龄和7周龄时分别测量EIR、OCT等眼球生物参数,明确Cre酶的插入是否影响小鼠的屈光发育。(2)视网膜DRD1过表达对小鼠屈光发育的影响:3周龄D1-Cre杂合子小鼠,按随机数字表法分为:①同龄对照组(NC);②视网膜下注射AAV8-DIO-GFP组(Vector组);③视网膜下注射AAV8-DIO-DRD1-GFP组(DRD1组)。各组分别给予视网膜下注射(0.5μL,1×1013颗粒/ml)相应的载体病毒(NC组不注射)。在小鼠3周龄、5周龄和7周龄时分别测量EIR、OCT等眼球生物参数;4周龄给予眼底拍照;6周龄给予ERG测量;7周龄EIR、OCT测量后取小鼠视网膜和巩膜检测DRD1的表达量等。(3)视网膜Gq-D1激活对小鼠屈光发育的影响:3周龄的D1-Cre小鼠经屈光检测筛选后,按随机数字表法分为:①视网膜下注射携带Gq-D1病毒,腹腔注射Saline组;③视网膜下注射携带Gq-D1病毒,腹腔注射CNO组。分别予病毒注射第二天腹腔注射Saline或CNO,在实验过程中每天早上9点到10点钟注射药物。在小鼠3周龄、5周龄和7周龄时分别测量EIR、OCT等眼球生物参数;4周龄给予眼底拍照;6周龄给予ERG测量;7周龄EIR、OCT测量后取小鼠视网膜和巩膜检测Gq-D1的表达量等。  结果:  1.D1-Cre杂合子小鼠和同窝仔野生型小鼠的屈光及眼轴均无明显差异。2.视网膜下注射DRD1过表达病毒后视网膜DRD1的表达量明显增加,视网膜下注射空载体病毒视网膜DRD1的表达量无明显变化。3.视网膜Gq-D1激活:CNO组相对于Saline组屈光明显向近视方向偏移。  结论:  1.Cre酶的插入不影响小鼠的屈光发育;2.DRD1过表达对小鼠屈光发育可能无明显影响。3.视网膜Gq-D1激活导致小鼠屈光明显向近视方向偏移。
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