婴幼儿食品中呕吐型蜡样芽孢杆菌的鉴别与多位点序列分析

来源 :武汉轻工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiangyuer
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蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus,简称Bc)是一种在自然环境中广泛存在的食源性致病菌,极易造成食品污染,引起食物中毒的Bc分为呕吐型和腹泻型两类,以呕吐型危害最大,会导致人的呕吐、腹泻、头晕、乏力等症状出现,严重时甚至致死。本研究从市场采购了101分婴幼儿食品,从中检测分离出了155株蜡样芽孢杆菌,通过PCR方法鉴别呕吐型菌株,并对呕吐型菌株进行生化特征和表型研究。通过随机扩增多态性DNA技术(RAPD)筛选出带型与标准株不同的呕吐型分离株进行ilvD序列分析,进一步筛选呕吐型株分离株进行多位点序列分型(MLST),得到等位基因型和序列型ST,并对比、分析MLST数据库中来自于五十多个国家提交的1707株蜡样芽孢杆菌群分离株,共989个ST型别的数据信息来研究蜡样芽孢杆菌的进化特点和遗传特性。101份样品中蜡样芽孢杆菌的检出率为98%,从155个分离株中鉴别出43株呕吐型菌株,呕吐型分离株占Bc分离株总数的27.7%。Bc在婴幼儿食品中的检出率极高,只有少部分没有被污染,说明我国婴幼儿辅食存在潜在的安全隐患,特别是大量高毒力呕吐型菌株的出现。RAPD和ilvD序列分析筛选出11株呕吐型分离株进行多位点序列分型,鉴定出9株呕吐型菌株中常见的ST26型,并新发现了一种新的ST989型两株。ST989与ST26型只有一个等位基因的差异,eburst算法上均属于同一个group。MLST数据库中的呕吐型菌株分布在三个group里,且在亚洲地区检出率较高,说明呕吐型蜡样芽孢杆菌在进化上还是比较保守的。研究菌株的进化关系和不同地域分布,可以了解其演化特点和进化规律,预测疾病与中毒事件的爆发。
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