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目前肝癌的发病率居全球癌症第五位,致死率居第三位,每年约近60万人死于肝癌。因此,研究肝癌的治疗具有其极大的意义。TGF-β/Smad3信号通路在肝癌发生发展和迁移侵袭中具有重要的作用。TGF-β能够促进肝纤维化形成,以及使肝纤维化向肝癌转变,而且,我们研究发现肝癌细胞中癌胚抗原(CEA)的表达受到TGF-β信号通路的调控。因此,我们通过对溶瘤腺病毒删除E1B 55 kDa基因,并使用CEA启动子代替E1A启动子,提高溶瘤腺病毒对肝癌细胞的靶向性和安全性,同时,让溶瘤腺病毒CD55携带TRAIL和MnSOD双基因,构建出溶瘤腺病毒CD55-TRAIL-IETD-MnSOD(CD55-TMn),并且使用低剂量Dox促进溶瘤腺病毒CD55-TMn复制和携带的抗癌基因表达,提高CD55-TMn对肝癌细胞的抑制作用。本研究中,使用CD55-EGFP感染经过TGF-β/Smad3信号通路p-Smad3抑制剂SIS3、TGF-β受体I/II型抑制剂LY2109761和低剂量Dox处理后的肝癌细胞,并且使用荧光显微镜观察EGFP蛋白的荧光强度和Western Blot检测E1A蛋白、Smad3蛋白和p-Smad3蛋白表达。结果表明,低剂量Dox能够增加溶瘤腺病毒CD55-TMn增殖复制和促进携带抗癌基因的表达。为了检测低剂量Dox的安全性,运用Western Blot、QPCR、细胞划痕实验和细胞侵袭实验检测肝癌细胞的迁移和侵袭。结果表明,低剂量Dox促进Smad3磷酸化,上调TGF-β/Smad3信号通路,但对促进肝癌细胞的迁移和侵袭无影响。运用MTT、Hoechst 33342染色、流式细胞Western Blot和动物模型检测溶瘤腺病毒CD55-TMn联合低剂量Dox对肝癌细胞生长抑制作用,结果表明,联合处理组比溶瘤腺病毒CD55-TMn或低剂量Dox任一单处理组更能有效抑制肝癌细胞生长。综上,我们构建CEA启动子调控的溶瘤腺病毒CD55-TMn能靶向肝癌发生发展和迁移侵袭相关的TGF-β(14)Smad3信号通路,并在低剂量Dox作用下,更有效率地抑制和杀伤肿瘤。因此,肿瘤靶向性溶瘤腺病毒CD55-TMn联合低剂量Dox,不仅能够有效地抑制和杀伤肝癌,而且还能降低化疗药物的使用,有望成为以TGF-β/Smad3信号通路为靶点的有效抑制肝癌的药物。