目的：随着IUD的发展与完善提高了育龄妇女对其的接受性，拓宽了IUD应用范围。但子宫异常出血依然是其最常见的副作用，表现为月经过多、经期延长或经前经后点滴出血。其发生机理是多因素的，终归结于子宫内膜血管生成、修复的异常，而血管的生成又受血管生成因子的调节。目前备受关注的两种促血管生成因子是VEGF和bFGF，尽管它们促进血管生成的机制不同，但都受雌孕激素的调节，在子宫内膜血管生成修复过程中互相配合，协同作用。本研究的目的就是利用宫腔镜技术，在直视定位下获取子宫内膜，采用免疫组化和计算机图像分析技术,探讨VEGF、bFGF在上环出血子宫内膜组织中的表达及意义，从血管形成机制方面找到IUD出血机理的新思路，为临床治疗提供理论依据。方法：资料来源：选自2001年9月至2002年12月在河北医科大学第二医院妇科门诊就诊患者。Ⅰ组：30例，为置IUD后有异常子宫出血妇女，其中金属“O”环15例，“T”型环15例。Ⅱ组：16例，为置IUD后月经周期正常的妇女，其中金属“O”环8例，“T”型环8例。Ⅲ组：15例，为无环月经周期正常的妇女。各组在年龄、上环时间、既往史方面均有可比性。月经周期正<WP=4>常者选择在月经干净3-7天检查，异常出血者则选择于增生期获取子宫内膜，并经苏木素—伊红（hematoxylin-eosion, HE）染色确定。入选对象为健康生育期妇女，全身检查和血化验正常，检查前3个月内未用过激素类药物。在宫腔镜定位下获取研究子宫内膜后，立即投入10%中性福尔马林液及时固定。常规脱水、透明、浸蜡及包埋，进行蜡块制备。所制成的标本行HE染色，进行组织形态观察，确认为增生期子宫内膜，排除子宫内膜息肉、粘膜下子宫肌瘤等疾病，进行免疫组化染色。应用免疫组织化学SP方法检测各组子宫内膜VEGF和bFGF蛋白的表达及分布情况。具体步骤如下：免疫组化染色步骤：（1）石蜡切片脱蜡至水后，3%双氧水孵育10分钟，灭活内源性过氧化酶。（2）采用电炉煮沸抗原修复。VEGF、 bFGF分别修复20分钟，15分钟。（3）正常山羊血清封闭，室温孵育10分钟。（4）滴加一抗，4℃冰箱过夜。（5）滴加生物素标记二抗，37℃孵育30分钟。（6）滴加辣根酶标记链酶卵白素，37℃孵育30分钟（7）DAB显色：VEGF显色3分钟，bFGF显色2分钟，自来水终止显色，苏木素复染5分钟，盐酸酒精分化20秒，酒精脱水，二甲苯透明，树胶封片后镜下观察。结果：㈠宫腔镜下观察:Ⅰ组子宫内膜可见明显充血及增粗的血管和点状、斑状出血灶，大量出血者可见血块、血丝悬浮于子宫腔内。金属“O”环形成环状压迹，出血灶多集中在环形区域内。“T”型环横臂紧贴子宫壁，<WP=5>其附近子宫内膜表面血管扩张，点状出血严重。Ⅱ组可见IUD位置正常，子宫内膜无充血及出血点。金属单环呈扁圆形，表面光亮，螺纹清晰可见。“T”型环铜丝盘旋完整，该部分呈黄色而有光泽，其横臂两端位于输卵管开口处。Ⅲ组子宫内膜呈淡红色，表面光滑，膨宫时内膜尤如平滑的天鹅绒在漂动。㈡组织学观察：子宫内膜HE染色显示Ⅰ组子宫内膜较Ⅱ组子宫内膜局部表面上皮脱落现象严重,在表面上皮下方有大量出血、坏死。IUD压迫区炎症反应重，可见上皮较薄，有溃疡、中性粒细胞及巨噬细胞，腺体及间质萎缩普遍可见。Ⅲ组呈典型的增殖期子宫内膜。㈢免疫组织化学观察：1.VEGF蛋白主要位于细胞浆，在腺上皮呈灶性分布，间质呈较散在分布。血管内皮细胞染色阳性。（1）腺上皮表达 Ⅰ组子宫内膜VEGF表达为弱阳性，Ⅱ组和Ⅲ组子宫内膜VEGF表达均为阳性。Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组间子宫内膜VEGF表达差异有显著性(P<0.05)。Ⅱ组和Ⅲ组间子宫内膜VEGF表达无显著性差异（P>0.05）。金属“O”环和“T”型环在各组之间无显著性差异（P>0.05）。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组子宫内膜阳性面积比分别为3.99%±0.15%，45.27%±0.43 %，45.36%±0.56%。（2）间质部表达 Ⅰ组、Ⅱ组及Ⅲ组子宫内膜在间质部均为散在弱表达或不表达，无统计学意义。2. bFGF蛋白染色定位于细胞浆。（1）腺上皮表达 Ⅰ组子宫内膜bFGF表达为弱阳性，Ⅱ组和Ⅲ组子宫内膜bFGF表达均为阳性。Ⅰ组和Ⅱ组、Ⅲ组间子宫内膜腺上皮表达差异有显著性(P<0.05)。Ⅱ组<WP=6>和Ⅲ组间子宫内膜bFGF表达无显著性差异（P>0.05）。金属“O”环和“T”型环在各组之间无显著性差异（P>0.05）。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组子宫内膜阳性面积比分别为3.68%±0.32%，47.39%±0.90%，47.26%±0.61%。（2）间质部表达 Ⅰ组子宫内膜bFGF在间质部表达为弱阳性，Ⅱ组和Ⅲ组间子宫内膜bFGF在间质部表达均为阳性表达，Ⅰ组和Ⅱ组、Ⅲ组间子宫内膜间质bFGF表达差异有显著性(P<0.05)。金属“O”环和“T”型环在各组之间无显著性差异（P>0.05）。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组子宫内膜阳性面积比分别为 4.50%±0.26%，53.88%±1.07%，54.89%±1.55%。结论：1．本研究表明上环出血的子宫内膜腺上皮VEGF、bFGF表达减弱，与对照组比较差异有显著性（P<0.05）。说明VEGF、bFGF表达下降，影响受损伤的子宫内膜、血管的再生修复能力，从而引起IUD出血。2.本研究中金属圆环与含铜T 型环之间在IUD出血子宫内膜中的表达无差异性，可能与样本量较少有关。3.利用宫腔镜