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第一部分PDCD4在早孕期小鼠子宫内膜的表达模式及其功能目的:胚胎着床的成功是囊胚和子宫内膜之间相互作用的结果。PDCD4作为最新被发现的抑癌基因之一,参与了多项细胞生理过程,包括细胞的凋亡、分化、DNA损伤、粘附等。课题组前期定量蛋白质组技术检测的结果显示其在第五天小鼠子宫内膜着床点和着床旁的表达有差异,但是其在胚胎植入过程中的作用却未见报道。因此我们对PDCD4在小鼠子宫内膜中的表达模式及其作用进行了研究,以期初步阐明其对胚胎植入的影响。方法:(1)采用荧光定量PCR、免疫蛋白印迹、免疫组化以及原位杂交研究PDCD4的m RNA以及蛋白在正常妊娠小鼠和假孕小鼠早孕期子宫内膜中的表达规律。(2)通过体内体外人工诱导蜕膜化,研究PDCD4对小鼠基质细胞蜕膜化的影响。(3)利用免疫蛋白印迹和免疫组化技术对女性不同月经周期子宫内膜以及自然流产子宫内膜中的PDCD4的蛋白表达进行了检测。结果：(1)在正常妊娠小鼠早孕期子宫内膜中,PDCD4在D4和D5表达显著高于D1,并且在D6和D7逐渐降低。此外,PDCD4在D6和D7着床旁的表达明显高于着床点。(2)在假孕早期小鼠子宫内膜中,PDCD4的表达没有显著差异,但是与正常妊娠小鼠早孕期对比后发现,PDCD4的表达受到胚泡信号诱导。(3)下调PDCD4对小鼠基质细胞的增殖、分化没有影响,但有利于蜕膜化。(4)在女性子宫内膜分泌期、增生期及蜕膜中PDCD4表达均不相同,分泌期>蜕膜>增生期。对比自然流产女性子宫内膜和正常蜕膜发现,PDCD4在自然流产子宫内膜中的蛋白表达明显高于正常女性蜕膜组织。结论:PDCD4在妊娠小鼠早孕期受到胚泡信号的诱导,在植入前后表达量发生改变,通过调控蜕膜化细胞适时凋亡从而有利于蜕膜化。而PDCD4在人类自然流产的子宫内膜中异常高表达,更进一步的提示了PDCD4可能对妊娠有着重要作用。第二部分SPOP在小鼠子宫内膜蜕膜化过程中的功能初探泛素化是一种翻译后调节机制,至今为止,其在胚胎着床方面的研究鲜有报道。在我们前期实验中,我们应用定量PCR,免疫蛋白印记及免疫组化技术检测了SPOP(泛素化连接酶E3的适配器)在正常妊娠小鼠早孕期、假孕小鼠早孕期、体内人工诱导蜕膜化以及激素模型中子宫内膜组织中的表达,结果显示SPOP可能参与子宫内膜蜕膜化进程。因此,本研究通过分离小鼠子宫内膜基质细胞体外人工诱导蜕膜化进行功能实验。结果发现,利用特异性si RNA敲低SPOP的表达会抑制基质细胞蜕膜化进程,同时促进基质细胞的增殖。提示,SPOP可能通过抑制基质细胞过度增殖参与调控蜕膜化。综上,我们推测泛素化通过影响基质细胞的蜕膜化参与胚胎植入过程。