X线诱导结直肠癌SW480细胞上皮间质转化及其信号传导通路的相关研究

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目的:1检测X线照射对结直肠癌SW480细胞上皮间质转化的影响。2检测X线照射后结直肠癌SW480细胞可能的上皮间质转化相关信号传导通路中间关键分子的变化,探讨X线照射诱导结直肠癌细胞发生上皮间质转化可能的信号传导通路。方法:1将人结直肠癌SW480细胞分为5组,分别用0、2、4、6、8Gy剂量的X线照射后培养48h。2应用Western blot检测X线照射后各组的间质化指标Vimentin的蛋白表达情况。3应用QRT-PCR和Western blot分别检测人类结直肠癌SW480细胞的K-ras和Smad3的mRNA和蛋白水平变化情况,分析人结直肠癌细胞SW480经X线照射引起发生上皮间质转化的可能信号传导通路。结果:1经过X线照射后,应用Western blot检测Vimentin蛋白水平,发现与对照0Gy剂量组相比,所有实验组的表达均升高。2QRT-PCR检测K-ras的mRNA水平,发现与对照0Gy剂量组相比,2Gy剂量组无明显变化(P>0.05),而4、6、8Gy剂量组均明显降低(P<0.05)。但4、6、8Gy剂量组之间无明显统计学意义(P>0.05)。3QRT-PCR检测Smad3的mRNA水平,发现与对照组0Gy相比,X线照射组2、4、6、8Gy剂量组的Smad3的mRNA表达水平均明显升高(P<0.05)。但是各照射组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。4应用Western blot检测K-ras蛋白水平,和对照0Gy剂量组相比,各实验组2、4、6、8Gy各剂量组K-ras蛋白的表达均明显下降(P<0.05)。5应用Western blot检测Smad3蛋白水平,和对照0Gy剂量组相比,除2Gy剂量组无明显变化外(P>0.05),其余4、6、8Gy剂量组Smad3蛋白表达水平均明显升高(P<0.05)。结论:1X线照射能够诱导结直肠癌细胞发生上皮间质转化。2X线照射有可能通过Smads信号途径介导结直肠癌SW480细胞发生上皮间质转化过程。3X线照射介导的结直肠癌SW480细胞发生上皮间质转化可能与K-ras途径无密切关系。
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