第一部分儿童重症肺炎支原体肺炎炎症特征的临床分析目的：(1)探讨儿童重症肺炎支原体肺炎(MPP)的炎症特征及判断指标。(2)探讨儿童重症肺炎支原体肺炎激素治疗前后临床炎症指标的动态变化规律,为临床治疗提供参考。方法：(1)回顾性分析复旦大学附属儿科医院2012年7月—2012年12月190例因MPP住院患儿的临床资料。按照重症MPP标准分为普通组MPP(N=150)和重症组MPP(N=40)。比较2组间的年龄、性别、发热时间、影像表现、外周血WBC、N比例、CRP、ESR、LDH、IL-6、PCT等方面的差别。对单因素分析后有统计学意义的炎症指标采用ROC曲线寻找判断重症MPP的最佳炎症指标。(2)重症组患儿中加用激素治疗25例,观察其病程中CRP的动态变化,分析炎症发生发展规律。结果：(1)重症组病例：年龄在5岁以上病例占65%,发热持续时间均超过7天,影像学均表现为大叶性肺炎。普通组病例：年龄小于5岁病例占66%,发热持续时间5-10天,影像学以支气管肺炎为主(占85%)。(2)与普通组比较,重症组的临床炎症指标(N比例、CRP、ESR、LDH、IL-6、PCT)显著升高(P<0.01)。通过ROC曲线分析,CRP、ESR、LDH、IL-6、PCT的ROC曲线下面积分别为0.909、0.673、0.633、0.744、0.732,其中CRP判断重症MPP准确度最高。CRP最佳临界值22.5mg/L。(3)起病时间：自发热第一天算起。25例激素治疗重症MPP患儿在初次就诊[5.0(2.0～10.0)天]、激素治疗前[9.0(3.0～16.0)天]、激素治疗后[17.0(10.0～27.0)天]时的CRP的检测值分别为14.0(8.0～35.8)mg/L,52.0(25.5～77.0) mg/L,8.0(8.0～12.8) mg/L。结论：(1)重症MPP患儿病程中可能存在过度的炎症反应,CRP是判断病情的较佳临床炎症指标。(2)MPP患儿年龄在5岁以上,发热5(2～10)天内CRP显著升高者,需密切随访CRP,若.5mg/L时需警惕重症MPP发生的可能,早期加用激素抗炎治疗,可能有助于改善病情。第二部分肺炎支原体基因拷贝数与肺炎支原体肺炎病情的关系目的：探讨肺炎支原体肺炎(MPP)患儿鼻咽吸取物中肺炎支原体(MP)基因拷贝数与肺炎支原体肺炎病情及炎症强度的关系。方法：本研究以2012年7月—2012年12月期间在复旦大学附属儿科医院因MPP住院患儿的鼻咽吸取物为研究对象,采用荧光定量PCR检测患儿鼻咽吸取物MP基因拷贝数。按照MPP的纳入及排除标准,共计190例患儿纳入临床分析,根据MP基因拷贝数分为：低拷贝组(103-105copies/ml)、高拷贝组(≥106copies/ml)。回顾性分析不同MP基因拷贝组间患儿的一般资料、临床表现、影像学以及临床炎症指标(CRP, ESR, LDH, IL-6, PCT)的差异。结果：(1)鼻咽吸取物与肺泡灌洗液之间MP基因拷贝数差异无统计学意义(P>0.05)。(2)与低拷贝组比较,高拷贝组大叶性肺炎发生率显著升高(P<0.01),CRP、LDH、 IL-6. PCT显著升高(P<0.01, P<0.05, P<0.05, P<0.01两组间年龄、性别、入院时病程、发热时间、ESR的差异无统计学意义(P>0.05)(3)重症组病例鼻咽吸取物中MP基因拷贝数明显高于普通组(P<0.01)。应用ROC曲线评价MP基因拷贝数对重症MPP的诊断价值(ROC曲线下面积0.703)。当MP基因拷贝数临界值在106/ml以上时灵敏度(0.6-0.8)、特异度(0.5-0.7)。(4)鼻咽吸取物中MP基因拷贝数与CRP、IL-6、PCT存在正相关(r=0.366,0.28,0.254,P<0.01),并且这种相关性在5岁以下儿童中仍然存在(r=0.311,0.303,0.222,P<0.05),但是5岁以上儿童中无显著相关性(P>0.05)。结论：(1)测定MPP患儿鼻咽吸取物中MP基因拷贝数可望作为判断病情严重程度和治疗好坏的一个指标。(2)5岁以下儿童鼻咽吸取物中MP基因拷贝数与炎症反应水平存在正相关,有效控制感染负荷,可能有助于控制炎症反应。第三部分肺炎支原体基因型与肺炎支原体肺炎病情的关系目的：(1)调查上海地区肺炎支原体(MP)基因型流行分布。(2)探讨肺炎支原体(MP)基因型与肺炎支原体肺炎(MPP)病情及炎症强度的关系。方法：2012年7月—2012年12月期间采集因MP感染在复旦大学附属儿科医院住院患儿的鼻咽吸取物标本,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析方法(PCR-RFLP)对201例MP-DNA拷贝数在105copies/ml以上的临床样本鉴别基因型。为验证分型准确性,挑选6例P1-Ⅰ标本、3例P1-Ⅱ型标本以及1例MP-FH参考株的PCR产物测序。按MPP的纳入及排除标准,共116例肺炎支原体肺炎患儿纳入临床资料分析。结果：(1)采用PCR-RFLP对201例临床标本做基因分型,P1-Ⅰ型191例,P1-Ⅱ型10例。(2)测序的6例P1-Ⅰ型样本、4例PⅠ-Ⅱ型样本与PUBMED GENEBANK中公布的对应的PⅠ-Ⅰ型、PⅠ-Ⅱ型序列相符。另外,6例P1-Ⅰ型临床标本突变率50%(3/6),3例PⅠ-Ⅱ型临床标本点突变率100%(3/3)。(3)110例P1-Ⅰ型感染患儿中普通MPP80例,重症MPP30例；6例P1-Ⅱ型感染患儿均为普通型肺炎。两种基因型组问发热时间具有明显统计学差异(P<0.05),年龄、性别、入院时病程、影像学、临床炎症指标、鼻咽分泌物中MP-DNA拷贝数均无明显统计学差异(P>0.05)。结论：(1)基于MP P1基因的PCR-RFLP方法能直接对201例临床标本进行MP基因分型,研究期间上海地区发生的MP感染以PI-I型为主。(2)MP基因分型可能与MPP病情及炎症反应程度有一定关系,但是仍有待进一步研究。