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本文通过溶血实验和小鼠急性毒性实验,评价市售水产品中创伤弧菌和创伤弧菌CICC21615菌株(V.vulnificus CICC21615)毒性大小。从市售水产品中分离获得的6株疑似创伤弧菌菌株经生化鉴定和溶细胞素基因扩增、基因测序后证实除2号分离菌株基因测序未测出外,其它5株确定为创伤弧菌。V.vulnificus CICC21615扩增出400bp左右的基因条带,而6株分离株均扩增出222bp左右的典型创伤弧菌溶细胞素基因条带。在溶血实验中,V.vulnificus CICC21615的溶血圈与菌落直径之比达到3.0,1-6号分离株分别为2.3、2.0、2.8、2.0、2.5和2.1。在小鼠急性毒性实验中,V.vulnificus CICC21615的半致死量(LD50)是3.776×107CFU/mL;而3号分离株的LD50为2.218×108CFU/mL。结果表明V.vulnificus CICC21615菌株毒性较3号分离株略强;3号菌株命名为V.vulnificus cd03。研究了市售水产品中分离获得的V.vulnificus cd03与V.vulnificus CICC21615毒性大小和小鼠脏器毒性反应差异。两菌株分别稀释到106CFU/mL、107CFU/mL和108CFU/mL,按照0.02mL菌液/g体重给小鼠腹腔注射。小鼠腹腔注射24h后,V.vulnificus CICC21615与V.vulnificus cd03108CFU/mL剂量组肝脏系数分别达到了7.30%和7.27%,分别高于同菌株107CFU/mL、106CFU/mL剂量组和对照组,差异显著。两株创伤弧菌108CFU/mL剂量组的小鼠肝脏细胞空泡变性明显,内部结构被破坏,细胞膜破裂。脾脏组织在108CFU/mL剂量组中细胞间隙增大,出现大量白色斑点,脾脏组织疏松明显。V.vulnificus CICC21615与V.vulnificus cd03108CFU/mL剂量组谷草(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)酶活增加量、谷胱甘肽s-转移酶(GST)酶活减少量分别最高达到16.62与11.62、5.77与5.6、46.25与37.29,差异显著,所有剂量组丙二醛(MDA)含量变化不显著。感染小鼠体内,创伤弧菌主要分布在肝脏和脾脏,少量分布在肾脏,血液中未分离出单菌落。试验结果表明,V.vulnificus CICC21615的脏器毒性要强于V.vulnificus cd03。菌液对小鼠肝脏和脾脏的损伤程度随着菌液浓度的增加而加重,并且高浓度的菌液既能加速小鼠肝脏组织的损伤程度,同时也提高了细胞自身修复的速度,可能原因在于激活并加快了细胞内部相关损伤修复反应。本文通过超高压处理实验,研究了超高压对水产品中创伤弧菌细胞超微结构与毒性的影响。创伤弧菌标准菌株(V.vulnificusulnificus CICC21615)和分离自水产品中的创伤弧菌(V.vulnificusulnificus Cd03)经100、150、200、250、300MPa压力处理进行菌存活数计数、透射电镜观察、260nm与280nm紫外吸收物测定、溶血试验和小鼠急性毒性实验,未处理组作为对照组。V.vulnificusulnificus CICC21615在200MPa压力处理下,只存活5个,致死率接近100%,250MPa及以上致死率100%,V.vulnificusulnificus Cd03在200MPa及以上压力处理致死率为100%。对照组的创伤弧菌细胞壁结构完整,胞浆分布均匀有序。随着压力的升高,细胞壁皱缩明显,同时细胞膜有明显的损伤且局部破裂,内含物泄漏、出现较大面积的透电子区。200MPa及以上压力处理的菌株,细胞膜消失,细胞拟核聚合,细菌细胞蛋白凝聚。在260nm紫外吸收中,V.vulnificusulnificus CICC21615和V.vulnificusulnificus Cd03分别在250MPa和200MPa达到最高点,分别达到0.105和0.119;而在280nm紫外吸收中,V.vulnificusulnificus CICC21615和V.vulnificusulnificus Cd03均在250MPa达到最高点,分别达到0.106和0.187。随着压力的升高,V.vulnificusulnificus CICC21615和V.vulnificusulnificus Cd03的溶血活性和急性毒性不断减小,两者溶血活性在200MPa及以上降为0,两者急性毒性在150MPa及其以上均对小鼠无致死作用。V.vulnificusulnificus Cd03在较低压力(200MPa)处理下,致死率就能达到100%,超高压致死细菌的原因与细胞膜的损伤有关,也与核酸与蛋白质的泄漏有关,同时拟核聚合与活性蛋白聚合也是重要的致死原因。实验研究还发现,随着压力的升高,菌株溶血活性与急性毒性均显著性下降,其直接原因与不同压力处理下的活菌数有关。