研究背景:系统性红斑狼疮（Systemic Lupus Erythematosus,SLE）是一种累及全身的慢性自身免疫性疾病。异常活跃的B细胞参与SLE发病的几乎所有阶段。PD-1（Programmed Cell Death-1,CD279）是属于CD28/CTLA-4家族的抑制性受体。PD-1与其配体PD-L1或PD-L2相互作用产生的抑制信号有助于维持免疫耐受。B细胞表面PD-1/PD-Ls表达水平可能在SLE发病机制中起着重要作用。目的:本研究旨在探索CD19⁺B细胞和CD19⁺CD20^-B细胞上PD-1/PD-Ls的表达情况,并探讨其在SLE疾病发生发展中的可能作用。方法:1.应用流式细胞仪检测SLE患者和健康对照（HC）外周血中CD19⁺B细胞表面PD-1/PD-Ls的表达情况,并与临床和实验室参数作相关性统计分析。应用磁珠分选技术分选SLE患者和健康对照（HC）外周血中CD19⁺B细胞并加入CPG或IFN-γ培养,测定不同时间段表面PD-1、PD-L1、PD-L2的表达情况。应用酶联免疫吸附试验检测SLE患者和健康对照（HC）血浆中可溶性PD-1、PD-L1、PD-L2的水平,并与临床和实验室参数作相关性统计分析。2.应用流式细胞仪检测SLE患者和健康对照（HC）外周血中CD19⁺CD20^+/-B细胞以及其上PD-1、PD-L1、PD-L2、CD80、CD86的表达情况,并与临床和实验室参数作相关性统计分析。应用磁珠分选技术分选SLE患者和健康对照（HC）外周血中CD19⁺CD20⁺B细胞和CD19⁺CD20^-B细胞并加入刺激剂培养,检测其细胞增殖和不同时间段分泌抗双链DNA（ds-DNA）和免疫球蛋白-G（IgG）情况。结果:1.SLE患者外周血CD19⁺B细胞表面PD-1、PD-L1、PD-L2的表达水平高于HC组;SLE患者活动组CD19⁺PD-1^-PD-L1⁺B细胞和CD19⁺PD-L1⁺PD-L2^-B细胞的频率显著高于稳定组和HC组,并且与部分疾病活动指标显著相关。在CPG或IFN-γ的刺激培养下,SLE患者CD19⁺B细胞表面PD-L1和PD-L2表达频率显著上调。SLE患者血浆中可溶性PD-L1和PD-L2的水平高于HC组;SLE患者可溶性PD-L1活动组高于稳定组,狼疮肾炎组高于非狼疮肾炎组,并且与SLEDAI评分显著相关。2.SLE患者活动组外周血CD19⁺CD20^-B细胞频率显著高于SLE患者稳定组和HC组;在SLE患者中,CD19⁺CD20^-B细胞表面PD-1、PD-L1、PD-L2和CD86的表达水平明显高于CD19⁺CD20⁺B细胞,并且与部分疾病活动指标显著相关。SLE患者CD19⁺CD20^-B细胞ds-DNA和IgG的分泌量高于HC组CD19⁺CD20^+/-B细胞分泌量,并且SLE患者CD19⁺CD20^-B细胞具有一定的分裂增殖能力。结论:研究表明SLE患者外周血B细胞表面PD-1/PD-Ls的异常表达和血浆可溶性PD-L1的异常水平以及CPG或IFN-γ刺激的B细胞表面PD-L1、PD-L2表达上调,均提示可能与SLE疾病的发生发展和活动有关。SLE患者外周血CD20^-B细胞和其表面PD-1、PD-L1、PD-L2和CD86的异常表达以及CD20^-B细胞具有增殖和分泌自身抗体的能力,均提示CD20^-B细胞可能是活化的B细胞,并且可能是CD20靶向治疗疗效不理想的原因。