目的：成功建立脊髓背侧半横切模型，观察轴突生长导向因子draxin在脊髓损伤不同时期的表达变化及其在损伤脊髓中的表达位置，为其在临床脊髓损伤疾病中的应用提供实验依据。方法：1动物及分组：2月龄体重约35g小鼠100只，按背侧脊髓半横切方式建立脊髓损伤模型，根据Reuter感觉功能评价方法，确定脊髓损伤背侧半横切模型建立成功。脊髓损伤模型随机分为正常未损伤组、损伤1天组、损伤2天组、损伤3天组、损伤4天组、损伤5天组、损伤6天组和损伤7天组，各10只,分别用于RT-PCR和Western Blot检测。其余损伤小鼠模型分成损伤1天组、损伤2天组、损伤3天组、损伤5天组，各5只，用于损伤后脊髓组织免疫组织化学抗draxin抗体染色观察，或用于免疫组织化学抗draxin抗体、抗DCC抗体双染观察。2mRNA提取及RT-PCR：正常未损伤组、损伤1天组、损伤2天组、损伤3天组、损伤4天组、损伤5天组、损伤6天组和损伤7天组每组各取5只，10%水合氯醛麻醉后冰上迅速取下损伤节段脊髓，去除椎骨，暴露脊髓组织，DEPC水配制的PBS清洗后，将组织迅速转移至Trizol中，常规提取mRNA，用NanoDrop2000C进行定量，反转录成cDNA，-20℃保存，用于PCR。3蛋白提取及Western Blot：正常未损伤组、损伤1天组、损伤2天组、损伤3天组、损伤4天组、损伤5天组、损伤6天组和损伤7天组每组各取5只，10%水合氯醛麻醉后冰上迅速取下损伤节段脊髓，去除椎骨，暴露脊髓组织，普通PBS清洗后迅速转移至裂解液中，充分匀浆后于冰上静置30min，12000rpm，4℃离心20min，取上清弃沉淀，小部分上清液用考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度，其余部分上清液置于-80℃冰箱储存，用于Western Blot检测。4组织制备及免疫组织化学染色观察：损伤1天组、损伤2天组、损伤3天组、损伤5天组，每组各取5只。将小鼠麻醉并暴露心脏，将输液针刺入左心室，同时用剪刀挑开右心耳，迅速生理盐水冲洗，至无血后，用4%多聚甲醛进行灌注。取损伤节段脊髓组织，PBS清洗干净，冷4%多聚甲醛固定2h，放入含30%蔗糖的PBS中充分沉降，取出组织OCT包埋，-80℃保存，用于免疫组织化学染色。结果：1成年期小鼠脊髓损伤后不同时期draxin mRNA的表达变化成年期小鼠draxin mRNA在无损伤正常脊髓、损伤后1天、损伤后2天、损伤后3天、损伤后4天、损伤后5天、损伤后6天、损伤后7天的脊髓组织中均有表达。随着时间的推移逐渐增高，损伤后第3天出现了一个表达高峰，后又表达下降。IOD数值在不同的检测时段有显著的差异(P＜0.05)，组间两两比较，损伤后3天与其他组有显著的差异（P＜0.05），有统计学意义。2成年期小鼠脊髓损伤后不同时期draxin蛋白的表达变化成年期小鼠draxin蛋白在无损伤正常脊髓、损伤后1天、损伤后2天、损伤后3天、损伤后4天、损伤后5天、损伤后6天、损伤后7天的脊髓组织中均有表达。随着时间的推移draxin蛋白的表达逐渐增高，并在损伤后第3-5天出现了一个表达高峰，后其表达又有所下降。IOD数值在不同的检测时段有显著的差异(P＜0.05)，组间两两比较，损伤后3-5天与其他组有显著的差异（P＜0.05），有统计学意义。3Draxin蛋白在成年期小鼠损伤脊髓中的表达位置及其变化Draxin阳性区域，荧光染色呈红色。Draxin红色信号集中于损伤切口的周边。并且在损伤后1天、损伤后2天、损伤后3天、损伤后5天不同时间阶段，表达量呈损伤后1到5天逐渐增多趋势，表达高峰集中于损伤后3-5天。4Draxin受体DCC在成年期小鼠损伤脊髓中的表达DCC为draxin受体之一。Draxin阳性区域，荧光染色呈红色；DCC阳性区域，荧光染色呈绿色。Draxin红色信号和DCC绿色信号表达位置都集中于切口周边，且draxin蛋白与DCC蛋白表达位置一致，图中呈暗黄色区域。结论：1Draxin mRNA和draxin蛋白在成年期小鼠正常脊髓组织中表达，表达含量微少，损伤后被诱导增多。2在成年期小鼠脊髓损伤的不同时间阶段，draxin的表达量不同，脊髓损伤后1-7天的不同时间内，出现了draxin mRNA和draxin蛋白损伤后3-5天的表达高峰。3Draxin蛋白在成年期小鼠损伤的脊髓中被诱导增多，且表达集中于损伤切口周边，并且在损伤后1-5天的不同时间内，呈现损伤后1天、损伤后2天、损伤后3天、损伤后5天表达量逐渐增多趋势。4DCC为draxin的受体之一，在成年期小鼠损伤脊髓中表达增多，且集中表达于损伤切口周边，与draxin蛋白表达位置一致。