罗伦隐球酵母对樱桃番茄果实的抗性诱导作用及其机理研究

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生物防治被认为是有望代替化学杀菌剂控制果蔬采后真菌病害的有效手段。用于生物防治的拮抗微生物除了能与病原菌进行营养与空间的竞争外,还能作为激发子激活果实体内的潜在抗性以增强其对病原菌的防御能力,因而具有较好的应用前景。但是拮抗菌作为激发子诱导抗性作用的机制尚不明确。本论文以罗伦隐球酵母(Cryptococcus lauentii)和不同成熟度的樱桃番茄果实为研究材料,探究了拮抗酵母对果实抗病性的诱导作用及对果实品质的影响,并从基因表达水平上对果实多个抗性相关信号通路的变化进行了分析,为系统地揭示拮抗酵母诱导果实产生抗性的作用机理奠定了基础。主要研究结果如下:1.用合适浓度的罗伦隐球酵母Claurentii对红熟和转色阶段樱桃番茄果实进行诱导处理,可显著增强番茄果实对灰霉病(灰葡萄孢霉Botrytiscinerea)和黑霉病(链格孢霉Alternariaalternata)的抗性,有效降低番茄果实采后真菌病害发生率及其带来的损失。对番茄果实酶活性的测定结果表明,拮抗酵母处理对樱桃番茄果实抗病能力的诱导作用可能与其体内超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、过氧化物酶、苯丙氨酸解氨酶和β-1,3-葡聚糖酶等抗性相关酶活性的提高有关。2.对抗性相关信号通路的基因表达测定结果显示,罗伦隐球酵母C lauentii处理后的番茄果实体内水杨酸信号通路被激活,而茉莉酸信号通路则先被抑制后被激活,油菜素内酯信号通路被激活,脱落酸信号通路先被激活后被抑制。这表明罗伦隐球酵母Claurentii可能通过调控樱桃番茄果实体内的植物激素信号通路来增强其抗性。3.用RT-qPCR技术对参与果实病原相关分子模式激发的免疫反应PTI路径的相关基因进行分析,结果发现BAKl、Bti9、MEKK1和WRKY33等基因显著上调表达。此外,酵母处理后果实体内的病程相关蛋白PR基因、编码其他抗菌蛋白和抗氧化酶的基因均上调表达。这证实罗伦隐球酵母Claurentii处理能够激活樱桃番茄果实体内PTI免疫反应。4.通过对一定贮藏期内果实色度、水分、硬度、糖度、可滴定酸和维生素C含量等品质的测定发现,罗伦隐球酵母Claurent.处理对樱桃番茄果实品质有正面作用。经拮抗酵母处理后,红熟果实在贮藏期内的色度更加鲜亮、水分和维生素C含量更高,转色阶段的果实硬度也在酵母处理后得以加强。
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