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转录因子对植物自身的生长发育及环境等因素的应答反应具有重要的调控作用。MYB类转录因子是最大的植物转录因子家族成员之一,参与了细胞分化、激素和环境因子应答等生物过程,并对植物次生代谢、花色素形成过程以及叶片等器官形态建成具有重要的调节作用。本文以花青素合成光敏感型‘津田’芜菁(Brassica rapa’Tsuda’)为试验材料,通过同源克隆的方法获得一个MYB类转录因子基因,序列比对分析发现与拟南芥MYB77转录因子基因具有很高的同源性,将其命名为BrMYB77基因,并对其进行亚细胞定位等研究,以期为MYB类转录因子的功能研究提供基础。主要研究结果如下：1、通过同源克隆的方法,以‘津田’芜菁幼苗总RNA为模板,RT-PCR扩增得到一个MYB类转录因子基因,序列比对分析发现与拟南芥MYB77转录因子基因具有很高的同源性,将其命名为BrMYB77基因。生物信息学分析表明BrMYB77基因具有两个MYB结构域,是典型的R2R3MYB转录因子基因。2、将BrMYB77基因与荧光蛋白基因融合,构建荧光表达载体GFP-BrMYB77,真空渗透法转化洋葱表皮细胞进行瞬时表达,荧光显微镜观察结果表明,BrMYB77蛋白定位于细胞核。3、将BrMYB77基因插入到pGEX-KG载体中,构建原核表达载体pGEX-BrMYB77, IPTG诱导目的蛋白表达,通过SDS-PAGE和Western bloting验证GST-BrMYB77融合蛋白的表达。纯化GST-BrMYB77融合蛋白,为进一步研究BrMYB77蛋白的功能奠定了基础。4、利用Gateway技术构建植物表达载体pCAMBIA1301-PMI-BrMYB77载体,通过农杆菌介导的方法转化番茄。通过甘露糖抗性和PCR筛选鉴定阳性苗。