柯萨奇病毒B心肌炎小鼠心室肌组织微小RNA1与连接蛋白43水平的研究

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目的观察柯萨奇病毒B(CVB)心肌炎小鼠心肌组织微小RNA1初始体(pri-miRNA-1)、dicer1mRNA和连接蛋白43(Cx43)表达变化,探讨病毒性心肌炎(VMC)微小RNA1(miRNA-1)和Cx43的关系及意义。方法140只4周龄雄性Balb/c小鼠随机分为VMC组80只和对照组60只,VMC组根据不同观察时间点分为7d亚组、14d亚组、28d亚组、42d亚组各20只,每个VMC亚组设置相应空白对照组各15只。VMC组每只小鼠腹腔注射CVB3 Nancy株悬液0.1ml,对照组每只小鼠腹腔注射不含病毒的RPMI1640培养基0.1ml。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测心室肌组织pri-miRNA-1、dicer1 mRNA、Cx43 mRNA水平表达,免疫组织化学法检测Cx43蛋白水平表达。结果(1)VMC小鼠心室肌组织pri-miRNA-1、dicer1 mRNA表达水平较对照组显著升高(均P﹤0.01);CVB感染后14d小鼠心室肌组织pri-miRNA-1、dicer1 mRNA表达水平最高;(2)VMC小鼠心室肌组织炎症病灶中变性、坏死周围心肌细胞Cx43蛋白表达明显减弱,甚至阴性,分布不规则; VMC小鼠心室肌组织Cx43 mRNA和蛋白表达水平较对照组均显著降低(均P﹤0.01);(3)相关性分析显示:VMC小鼠心室肌组织的pri-miRNA-1与dicer1mRNA水平呈显著正相关(r=0.462 ,P<0.01);与Cx43mRNA水平呈显著负相关(r=-0.360,P<0.01);与Cx43蛋白水平呈显著负相关(r=-0.257,P<0.05)。结论CVB心肌炎小鼠心室肌组织pri-miRNA-1、dicer1mRNA水平表达上调,Cx43蛋白表达下降,miRNA-1可能参与VMC的发病过程,并可能抑制Cx43蛋白表达。
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