肺炎球菌是作为社区获得性肺炎或下呼吸道感染症的病原菌检出频率最高的菌,是一种革兰阳性球菌,肺炎链球菌不仅在中国而且在全世界范围内都是患病率、死亡率高的病原菌之一。肺炎链球菌感染症状不仅频率高,而且容易演变成重症,因此治疗开始时选择适当的抗菌药是非常重要的。另外,从感染症治疗的原则来看,由于尽可能早期确定病原菌能够早期地选择准确地治疗方法,所以与以后降低医疗成本,防止耐药性药菌的出现紧密相关,因此极其重要。已知肺炎链球菌细胞壁多糖(C-PS)是肺炎链球菌菌株所共有抗原,存在于所有血清型肺炎链球菌的细胞壁中,为建立检测所有型肺炎菌株的方法提供了可能性。在研究过程中,包括了肺炎链球菌的发酵,C-PS的纯化,C-PS与白喉毒素无毒突变体(CRM197)蛋白载体的结合,以及其结合产物对小鼠免疫产生抗体的纯化,竞争酶联免疫吸附法检测血清中C-PS含量方法的建立。通过研究,得到以下结论:(1)C-PS纯化工艺中,处理条件(pH,碱处理时间等条件)对C-PS多糖保留量的影响,研究表明pH 11.0±0.5,碱育时间为60min时,用透析方法纯化的多糖保留量及纯度最高;(2)本文对比了采用溴化氰和高碘酸钠两种多糖活化方法,并比较可得两种方法处理所得活化的C-PS产物中,溴化氰活化法可产生较好的活化结果;(3)单独注射C-PS多糖未能产生高滴度抗体,而通过共价结合方法所得的C-PS-CRM197结合物在小鼠体内诱导出高水平血清抗C-PS抗体,并且获得了免疫记忆;(4)本文建立了一种竞争ELISA方法,用来检测样品中C-PS抗原,并且验证了该方法的最低检测线为18.4ng/mL,重复性CV值为4.7%,符合国标要求,组内批间精密度RSD结果为4%,符合检测要求。本文建立了一种利用人类血样进行快速检测肺炎链球菌的方法,该方法具有准确性好,灵敏度高,操作简便等优势,而且检测结果不受接受抗菌药物治疗的影响,不仅能够快速提供诊断依据,更在抗菌药物使用方面具有指导意义,为诊断肺炎链球菌肺炎提供了快速、有效的辅助诊断方法。