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本实验基于课题组以往的研究,通过提取和纯化获得了纯化的银杏叶多糖(P-PGBL)。然后,通过CCK-8比色法检测了不同浓度下的P-PGBL对炎症细胞的毒害作用,结果发现,本实验所用P-PGBL浓度对巨噬细胞无毒害作用。进一步研究P-PGBL对炎症因子表达的影响,结果发现,P-PGBL可在转录和翻译两种水平上抑制炎症因子IL-6和IL-1β的表达。通过免疫荧光法、流式细胞术和Western Blot方法对TLR4蛋白的表达情况进行检测,结果发现,P-PGBL能够抑制LPS诱导的TLR4蛋白的高表达。继续对TLR4的mRNA表达情况进行检测,发现P-PGBL也能够抑制LPS诱导的巨噬细胞TLR4的mRNA高表达。进一步研究发现,P-PGBL还能够抑制LPS诱导的核因子NF-κB蛋白及其mRNA的高表达。综合以上结果,我们发现P-PGBL可以通过调控TLR4/NF-κB信号通路,抑制炎症细胞的IL-6和IL-1β等炎症因子表达来发挥抗炎活性。本实验以TLR4为靶点,深入研究了P-PGBL的具体抗炎分子机制,为银杏叶资源的深入开发奠定了基础;同时也为以TLR4为靶点的疾病治疗指引了新的方向。