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促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)作为下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)最上级的激素,启动了HPA轴对应激原的应答;同时,CRH也参与了交感-肾上腺髓质系统的活化。因此,一般认为CRH是应激过程中最重要的始动因子之一,CRH分泌增加可作为反映机体应激状态的客观指标。传统认为,糖皮质激素(GC)与其胞浆受体(iGR)结合后,可通过直接或间接方式抑制CRH的表达。因此,大剂量GC应对CRH具有非常强烈的负反馈抑制作用。但是,有研究显示,大剂量(≥10-6mol/L)GC并不能完全抑制下丘脑CRH的生成,下丘脑仍可有明显的CRH的合成与分泌。提示GC在CRH合成与分泌过程中可能还有更为复杂的调节作用和机制存在。另一方面,此时血液GC浓度远远超出iGR结合饱合浓度(高出上千倍),提示这些现象可能是通过经典的GR以外的途径发挥作用的,而与新近认识到的GC膜受体(mGR)可能有密切关系。因此,我们推测大剂量GC可能通过其细胞膜上受体mGR对下丘脑的CRH合成与分泌具有一定的调节作用。研究目的本研究旨在通过(1)观察大剂量GC对下丘脑CRH转录与合成的影响及规律,(2)寻找大剂量GC对下丘脑CRH转录与合成的非胞浆受体的可能调节途径与机制,探讨多种病理情况下CRH持续产生相关机制、临床大剂量GC治疗的机制与功效等,为大剂量GC在严重创伤早期的临床救治中的应用提供新的思路和认识。主要步聚与方法1.观察大剂量GC对下丘脑室旁核(PVN)神经元转录和表达CRH的影响。观察了在10-6mol/L地塞米松(DEX)、10-9mol/L DEX以及在糖皮质激素受体拮抗剂RU486干预条件下,PVN神经元CRH mRNA和其蛋白质合成的变化,以探讨大剂量GC对PVN神经元CRH转录与合成的影响及规律。2.探讨大剂量GC对PVN神经元细胞膜电生理活动的作用和影响。神经元大多生理功能的依赖于其细胞膜电活动的改变。因此,在前部分实验基础上,本部分实验着重对比观察和研究了10-6mol/L DEX、10-9mol/L DEX、以及RU486拮抗条