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1、目的:多发性硬化(Multiple sclerosis.MS)是一种中枢神经系统慢性炎症脱髓鞘疾病,它的典型病理特征是炎性细胞浸润、髓鞘脱失、轴索变性以及胶质细胞增生等,目前许多研究表明多发性硬化早期即存在血脑屏障破坏。基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinases-9.MMP-9)是一类锌离子依赖的蛋白酶,具有破坏血脑屏障,降解细胞外基质、髓鞘碱性蛋白的作用,可以导致血管内皮细胞通透性增高,进而导致T淋巴细胞等炎症细胞穿透血管基底膜进入中枢神经系统。MS血脑屏障的破坏、炎性细胞浸润、髓鞘降解以及轴索的损伤等主要病理过程均与MMP-9活性异常增高有关。颈椎病神经根型发病率为50-60%,是由于颈椎间盘向侧后方突出、关节增生及肥大,刺激或压迫神经根所致。临床上开始多为颈肩痛,并向上肢放射,皮肤可有麻木、过敏等感觉异常,颈椎病神经根型临床表现与多发性硬化颇为相似。血脑屏障破坏在MS的病理生理中起重要作用,血管通透性的改变早于MS影像学的特征性变化。核磁共振(MRI)增强扫描可见活动性病灶强化,这与病变血管周围炎性改变,血脑屏障破坏,血管通透性升高,造影剂外渗有关,MMP-9是引起血脑屏障破坏的重要因素,MS患者外周血MMP-9突然升高与新病灶的形成有关,故推断MS复发期较缓解期的MMP-9表达不同。本研究旨在探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的检测能否成为自身免疫性疾病多发性硬化(MS)复发-缓解型(R-R型)和颈椎病神经根型相鉴别的一种方法,以及MMP-9的检测对判断MS的复发和缓解是否具有临床意义。2、方法:2.1研究分组:本研究分别对经CT检查、肌电图检查及核磁共振扫描已确诊的MS(R-R型)患者26例(复发期和缓解期),颈椎病神经根型患者30例(复发期和缓解期),正常对照组30例共5组分别抽取不加抗凝的静脉血2ml送MMP-9检测。2.2试验仪器:MMP-9检测所选用的设备主要有酶标仪、洗板机、数字显示隔水式电热恒温培养箱、离心机、移液枪、漩涡混合器、烘箱、分液器及微量电动组织匀浆器等。2.3试验过程:本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人MMP-9单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的MMP-9与单抗结合,加入生物素化的抗人MMP-9,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,MMP-9浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中MMP-9浓度,将所获得的数据再进行统计学分析。3、结果:3.1 MS(R-R型)患者其复发期和缓解期的MMP-9分别与正常对照组MMP-9比较均有统计学差异。3.2 颈椎病神经根型患者其复发期和缓解期的MMP-9分别与正常对照组MMP-9比较没有统计学差异。3.3 MS(R-R型)患者其复发期和缓解期的MMP-9分别与颈椎病神经根型患者其复发期和缓解期的MMP-9比较均有统计学差异。3.4 MS患者的复发期与缓解期的MMP-9比较,有统计学差异。4、结论4.1 MMP-9的检测对于MS(R-R型)和颈椎病神经根型的鉴别具有临床意义。4.2对于MS(R-R型)患者定期复查MMP-9可以早期判断及预防有无疾病复发,为积极诊断及治疗提供帮助。4.3 MMP-9的检测对于颈椎病神经根型患者无现实临床意义。