黑翅土白蚁巢内共生真菌漆酶的分离纯化及其理化性质研究

来源 :浙江大学农业与生物技术学院 浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:little_ant2
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通过硫酸铵沉淀和离子交换柱层析,我们从黑翅土白蚁巢内共生真菌上分离到一个漆酶蛋白,纯化倍数为16.83,比活力为211.11U mg-1。经SDS-PAGE电泳结果显示条带单一,表观分子量为65kDa。对其酶学性质进行研究,结果显示,以ABTS为底物时,该漆酶最适pH为4.0,最适温度为10℃。当温度在10-30℃时,酶活比较稳定;当温度超过30℃后,酶活显著降低。以ABTS为底物时,该酶的Vmax和Km值分别为3.62μmol min-1 mg-1和119.52μM。乙醇作为抑制因子对漆酶活性影响很大,当乙醇浓度为70%时会抑制60%的漆酶酶活。同时,金属离子Mg2+、Ba2+和Fe2+对酶活也有抑制作用,当离子浓度从1mM上升到5mM时,对酶活的抑制性分别上升17.2%、5.3%和9.4%。特别是Fe2+,即使在1mM的浓度下,对酶活的抑制性也达到了89%。
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