基于Meta分析和网络药理学探讨健脾益肾举陷汤干预重症肌无力(痿证)的疗效

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目的:运用Meta分析,对健脾益肾方剂联合常规西药治疗重症肌无力的相关RCTs进行研究分析,以评估健脾益肾中药联合常规西药相比于单纯西药治疗重症肌无力的临床疗效及安全性;运用网络药理学方法,对健脾益肾举陷汤核心药对“黄芪-熟地”为中心,从多成分、多靶点、多径路等角度全面预测并阐释健脾益肾举陷汤关键药物治疗MG的可能作用机制,为更深入的基础研究提供参考。方法:Meta分析,利用计算机系统对相关的六个数据库使用相关检索策略进行信息检索,将检索筛选得出的相关文献导入至文献管理软件并严格遵循提前制定的纳入排除标准,甄选出满足研究要求的文献资料,对最后纳入的文献中关于临床疗效及相关指标加以提取,将其录入Review Manager 5.3软件软件进行相关数据分析,确定研究结论。网络药理学,查找健脾益肾举陷汤核心药对“黄芪-熟地”相关活性成分,筛选潜在作用靶点及重症肌无力相关靶标,将黄芪-熟地药对的有效成分相关靶点和重症肌无力的疾病相关靶点取交集得到,使用Cytoscape绘制交集靶点与相关的活性成分网络图。使用Cytoscape内置的Network analysis工具分析网络的拓扑学属性以评估节点的重要性,筛选出黄芪-熟地治疗MG的重要成分和相关的关键靶点。利用相关的系统软件和程序包,对筛选的得到的靶点开展蛋白相互作用网络建模、GO富集统计分析及KEGG富集分析,并完成绘图。结果:基于Meta分析:1.共检索到10篇以健脾结合益肾法联合西药治疗对照单纯西医药治疗重症肌无力的文献,纳入患者1018例。2.在文献质量方面,Cochrane偏倚评估工具分析结果提示纳入的RCT的质量相对不高,在随机序列隐藏及盲法的实施等方面报告的不足,且大多数未提及随机分配的隐匿及设盲。3.在临床有效率方面,不论是采用许氏相对评分法、QMG评分法亦或是中医症候评分进行临床有效率的判定,健脾益肾中药结合常规西药治疗MG相较于单纯西药对照组,均具有一定的优势,可以显著提高临床有效率。4.在复发率方面,纳入的研究显示健脾益肾中药联合常规西药治疗可降低重症肌无力患者复发率。5.在不良反应发生率方面,纳入的研究显示中西结合组相较于单纯西药组并未显示出明显的优势。基于网络药理学:1.筛选出健脾益肾举陷汤核心药对“黄芪-熟地”19个活性化合物,201个潜在作用靶点。2.筛选得到686个MG相关靶点。3.化合物与疾病取交集,获得47个共同靶点即黄芪-熟地治疗MG的潜在作用靶点。4.通过Network analysis工具,解析网络的拓扑学属性以此得到8个潜在的关键活性成分,分别为槲皮素(Quercetin)、山奈酚(Kaempferol)、芒柄花黄素(Formononetin)、豆甾醇(Stigmasterol)、异鼠李素(Isorhamnetin)等。5.构建蛋白互作网络,得到6个核心靶点,为ESR1、MAPK14、JUN、AKT1、TNF、CASP3。6.GO富集分析的结果中,富集在生物过程(BP)有2121个条目,分子功能(MF)有179个条目,细胞组成(CC)有51个条目。7.KEGG富集分析共获得有关作用通路206条,显著富集的通路有IL-17信号通路(IL-17 signaling pathway)、TNF信号通路、内分泌抵抗、T细胞受体信号通路、TLR信号通路等。结论:Meta分析提示健脾益肾中药联合常规西药相较于单纯西药组在提高临床有效率及降低复发率方面具有一定优势,但安全性较单纯西药治疗并无显著差异。考虑到系统评价证据的质量决定于原始研究的质量,而本次纳入的原始RCT的质量相对不高,且文献质量评价提示可能存在着研究者主观的偏倚,因此影响到研究结果的报告客观性与准确性度。这提示我们,当下,许多中西结合治疗重症肌无力的随机对照试验的文献在方法学本身的设计上仍不够严密,因此,未来需要更多大样本、具有前瞻性且高质量的随机对照试验进行结果的进一步验证。网络药理学研究提示健脾益肾举陷汤汤的君药“黄芪-熟地”可能主要通过槲皮素、山奈酚、芒柄花黄素、豆甾醇、异鼠李素等有效活性成分的抗胆碱酯酶活性、抗炎、调节免疫等作用靶向治疗MG,证实它们具有极大的研究空间,可能为治疗MG药物的研发提供物质基础。但本部分研究仅能起到预测作用,确切的治疗靶点及成分作用通路亟待进一步的药理学及动物实验验证。
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