绞股蓝降血糖活性物质的作用研究

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目的:糖尿病(diabetes mellitus, DM)是由于胰岛素分泌减少、功能减退或者胰岛素抵抗等相关情况导致血糖含量升高,从而引起糖、脂肪和蛋白质代谢紊乱以及逐步造成其他器官的损伤和功能障碍。近年来,随着我国社会经济条件的改善,人民生活水平的不断提高,饮食结构的改变,劳动强度的降低,人均平均寿命的延长,应急状态增多,以及糖尿病检测手段的改进,与世界各国一样,我国糖尿病的患病率也在逐渐的上升,目前我国患病人数已进入了世界前列,因此研究糖尿病的发病机理、病症特征、一些预防措施和治疗手段是非常有意义的。绞股蓝含有多种成分,具有多种药理作用,据报道绞股蓝除了具有消炎、降血脂作用外,还可能具有降血糖作用,本文就是从小鼠动物药理实验及体内药物分析方面进一步验证绞股蓝降血糖的作用、探究其降血糖机理,为绞股蓝的临床应用提供一定的理论依据。方法:本文以绞股蓝干浸膏得率为考察指标,用四因素三水平的正交设计实验方法来优化绞股蓝水提醇醇沉工艺,找出总提物提取的最佳工艺条件,然后用大孔树脂将总提物分为不同的极性部位,根据极性部位来确定动物实验分组。建立和比较实验性糖尿病小鼠的造模方法,确定用注射STZ(链脲佐菌素)造糖尿病小鼠模型的最佳剂量;研究绞股蓝不同的极性部位对高血糖小鼠血糖(GLU)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、游离脂肪酸(NEFA)的影响,通过各项生化指标水平来确定绞股蓝降血糖的最有效的部位。最后用高效液相初步探究绞股蓝降血糖最有效部位的物质组成。结果:采用10倍量的双蒸水提取三次,每次提取1.5个小时是绞股蓝水提工艺的最佳条件;将绞股蓝总提物醇沉到60%(酒精密度计测量),静止24小时是绞股蓝醇沉工艺的最佳条件;本次实验昆明小鼠糖尿病模型的最佳造模剂量是一次性腹腔注射160mg-kg-1STZ(链脲佐菌素);通过动物药理实验,得出与模型组小鼠相比,绞股蓝70%醇部位能极显著降性降低高血糖小鼠体内的GLU和NEFA水平(P<0.01),能极显著升高高血糖小鼠体内的SOD水平(P<0.01),显著降低TC、MDA(P<0.05)浓度;绞股蓝水洗部位能显著性降低高血糖小鼠体内的GLU、TC、MDA(P<0.05)浓度;绞股蓝30%醇部位与模型组比较不具有显著性。通过HPLC鉴定得出可能有三种物质在降血糖方面起主要药效作用。结论:(1)采用正交设计实验方法,以绞股蓝干浸膏得率为考察指标,对水提工艺和醇沉工艺进行优化,为绞股蓝的大规模生产提供了一定的理论依据。(2)利用STZ建立糖尿病模型是目前国内外应用最多的一种方法,本实验一次性腹腔注射STZ140、160、180mg·kg-1三个剂量,对STZ造模的成活率、所造模型的血糖浓度及稳定性进行研究,为日后糖尿病模型的研究提供了理论依据。(3)在绞股蓝有效部位筛选上,本实验发现了绞股蓝总提物、绞股蓝组分Ⅰ和绞股蓝组分Ⅲ都能不同程度的降低糖尿病高血糖模型小鼠的血糖浓度,绞股蓝组分Ⅲ降血糖的能力强于绞股蓝组分Ⅰ,绞股蓝组分Ⅱ不具有降血糖的能力。除此之外,绞股蓝组分Ⅲ还能缓解由糖尿病引起的高血脂症状,而绞股蓝组分Ⅰ和绞股蓝组分Ⅱ缓解高血脂症的能力较差,为绞股蓝的开发提供了坚实的基础。(4)对有效成分进行分析,发现可能有三种成分,再从分析图谱可以了解该物质有可能是黄酮类物质或者是皂苷类物质,这两类物质都具有一定的药效活性,如果是皂苷类物质,因为皂苷类物质具有消炎作用,那么暗示着糖尿病的治疗跟减轻炎症也有一定的关系的。
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