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目的通过形态学及分子生物学等方法检测白藜芦醇(RES)对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜细胞的凋亡影响,探讨白藜芦醇对AA大鼠治疗作用和部分机制。方法30只SD雄性大鼠随机分为2组:正常对照组(10只),模型组(20只)。模型组在足趾皮下弗氏完全佐剂(FCA)诱导关节炎24d,其足趾出现继发性免疫炎症反应,以关节肿胀度、多发性关节炎指数、体重等改变评价大鼠AA模型的建立情况;处死2组大鼠,取出对侧(非致炎侧)踝关节小块滑膜组织,运用组织块培养法分离、培养大鼠踝关节滑膜细胞,免疫组化法观察血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)在滑膜细胞上的表达情况,以鉴定成纤维样滑膜细胞;将传代(3-5代)后的滑膜细胞加入不同浓度的RES溶液,应用透射电子显微镜观测踝关节滑膜细胞超微结构的改变,了解滑膜细胞的形态学变化以及对滑膜细胞凋亡的影响,运用CCK-8法检测RES对滑膜细胞活性的影响;探讨RES对AA大鼠的治疗作用,琼脂凝胶电泳观察滑膜细胞DNA碎片的改变;利用TUNEL染色,观察滑膜细胞凋亡情况;Hoechst-33258荧光染色,观察滑膜细胞核是否出现凋亡小体;采用Western blot法检测分析滑膜细胞的Caspase-3蛋白的表达变化。探讨RES对AA大鼠滑膜细胞凋亡的作用机理。结果倒置显微镜下观察,传代滑膜细胞兔抗鼠VCAM-1多克隆抗体标记阳性。电镜观察可见RES(20、50μmol/L)对AA大鼠滑膜细胞中线粒体、高尔基体等细胞器的数量及形态有恢复作用,RES可以诱导细胞凋亡,电镜观察有典型的凋亡细胞核。CCK-8法显示RES抑制滑膜细胞增殖,并且呈剂量依赖性趋势。TUNEL染色观察到高浓度(20、50μmol/L)的RES能明显促进滑膜细胞的凋亡;Hoechst-33258荧光染色,观察到细胞核出现凋亡小体;琼脂凝胶电泳呈现出阶梯状条带,Western blot分析显示,在一定范围内,随着RES浓度的升高明显增加了Caspase-3蛋白的表达,其升高幅度与RES浓度呈正相关。结论RES能改善滑膜细胞的分泌炎性介质及恢复滑膜细胞中具有分泌功能的细胞器的功能是其治疗RA的途径之一。RES能促进滑膜细胞的凋亡抑制AA大鼠滑膜细胞的增殖,其机制与RES诱导滑膜细胞Caspase-3的活化有关。