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背景：作为一种抑制蛋白质合成的抗生素，anisomycin在消弱小鼠恢复创伤记忆巩固的研究由来已久。本课题组之前的体内外实验研究也证实了anisomycin能够通过影响诸如IL-2、IL-4、IFN-γ等T细胞增殖活化相关的经典细胞因子的表达进而抑制T细胞的增殖、活化等生物学行为，在小鼠T细胞介导的免疫应答中起重要作用，但是anisomycin对T细胞迁移、趋化和凋亡等其它生物学行为及其相关细胞因子的表达有何影响并未见报道，本研究利用抗体芯片技术首次比较系统地分析了anisomycin诱导T细胞细胞因子的差异性表达，为探讨anisomycin抑制T细胞生物学行为的机制奠定一定的基础。目的：筛选anisomycin处理后的T细胞的细胞因子差异表达谱，探索差异表达因子MMP9和IGFBP6在anisomycin诱导T细胞凋亡中的作用。方法：免疫磁珠负选法分离小鼠淋巴结中的T细胞，用anisomycin处理T细胞，利用抗体芯片技术从144个细胞因子中筛出表达稳定差异的细胞因子；利用Trizol法提取细胞总RNA，通过RT-PCR和qPCR在mRNA水平验证差异表达因子ccl9、cxcl9、il-17e、igfbp6、ccl24和mmp9的mRNA变化。ELISA再次验证T细胞培养上清中IGFBP6和MMP9（Pro）的表达水平。选择感兴趣并差异表达稳定的MMP9和IGFBP6因子，在anisomycin处理细胞前加入JNK信号通路抑制剂SP600125，流式细胞术检测T细胞凋亡率，RT-PCR和qPCR检测mmp9、igfbp6、和jnk2mRNA水平，ELISA检测T细胞上清中MMP9、IGFBP6和相关细胞因子的含量，Western Blot检测MMP9、IGFBP6、JNK和p-JNK蛋白的变化，探讨MMP9和IGFBP6在anisomycin诱导T细胞凋亡中的作用及其与anisomycin活化的JNK信号通路有何关联。结果：anisomycin能诱导T细胞分泌的14个相关细胞因子上调，47个相关细胞因子下调。其中CCL9、CXCL9、CCL24和MMP9（Pro）细胞因子的表达明显下调，而细胞因子IL-17E和IGFBP6的表达明显上调。anisomycin处理T细胞后细胞培养上清中MMP9的水平显著降低，而IGFBP6的分泌量在anisomycin处理6h后明显上调。应用JNK信号通路抑制剂SP600125处理细胞，RT-PCR、qPCR、ELISA和Western Blot结果都显示，anisomycin处理组细胞MMP9的表达下调，而IGFBP6的表达上调，SP600125则可以不同程度逆转anisomycin的作用，提示MMP9和IGFBP6可能通过JNK信号通路的活化介导anisomycin引起的T细胞凋亡。ELISA检测显示anisomycin处理组培养上清中IL-1β和IL-6的表达都降低，IL-10和TGF-β1的表达则升高，而SP600125预处理后IL-6、IL-10和TGF-β1的表达有所逆转。结论：anisomycin可导致T细胞生成的144种细胞因子中61个因子的差异表达，其中anisomycin可以显著下调CCL9、CXCL9、CCL24和MMP9，上调IL-17E和IGFBP6的表达；anisomycin可能通过活化JNK信号通路调节T细胞MMP9和IGFBP6的表达而参与调控T细胞凋亡。