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目的 甲状腺相关眼病(TAO)是以眼外肌和眶脂肪/结缔组织容量增多为特征的自身免疫性疾病。眼眶内前脂肪成纤维细胞在适当条件下能转化为脂肪细胞,使眼眶脂肪组织增多,引起眼球前突,它还能分泌多种细胞因子;瘦素(leptin)作为脂肪细胞分泌的特异性因子,它可能通过多种机制参与TAO的发生发展。本研究的目的是利用TAO患者和正常人眼眶脂肪组织和体外诱导分化的眼眶脂肪细胞,检测瘦素mRNA的表达情况;TNF-α、IL-6对瘦素mRNA表达的影响;重组人瘦素蛋白(rh-leptin)对TAO患者眼眶前脂肪成纤维细胞增殖、移行以及细胞分化过程中细胞内脂质形成的作用。探讨瘦素在TAO发病机制中的作用及意义,探索防治TAO的新途径。 方法 1.提取TAO患者和正常人眼眶脂肪组织总RNA,用实时荧光定量PCR的方法,检测瘦素mRNA的表达。 2.对体外培养TAO患者与正常人眼眶前脂肪成纤维细胞进行诱导分化,用实时荧光定量PCR的方法检测分化后细胞内瘦素mRNA的表达。油红染色结合图像分析技术测定分化过程中细胞内脂质的形成。 3.采用不同浓度、作用时间的TNF-α、IL-6处理TAO患者分化第10