论文部分内容阅读
第一部分Snail1在结直肠癌的表达与患者预后及5-氟尿嘧啶耐药相关目的:探讨Snail1在结直肠癌中表达水平与患者预后、耐药的关系。材料和方法:肠癌组织芯片中通过免疫组化检测Snail1(Snail family transcriptional repressor 1)的表达情况,并检验其与预后及化疗抵抗的关系;细胞系内过表达Snail1并检测其对5-氟尿嘧啶处理的反应。结果:免疫组化结果显示Snail1表达越高,预后越差,且与5-氟尿嘧啶化疗抵抗相关;在体外实验中,Snail1过表达细胞系对5-氟尿嘧啶呈现耐药。结论:Snail1能够影响结直肠癌患者预后及对5-氟尿嘧啶治疗的反应性。第二部分DKK4参与Snail1介导的结直肠癌对5-氟尿嘧啶的耐药目的:探讨DKK4是否参与Snail1介导的结直肠癌对5-氟尿嘧啶的化疗抵抗材料和方法:通过免疫组化检测肠癌中DKK4(dickkopf WNT signaling pathway inhibitor 4)表达情况并检验与Snail1表达的关系;在过表达及干扰Snail1的肠癌细胞系中检验DKK4表达水平,并通过si-RNA干扰DKK4表达,并观察Snail-1过表达细胞系对5-氟尿嘧啶处理的反应。结果:免疫组化结果显示肠癌中DKK4与Snail1表达呈现正相关;在过表达及干扰Snail1的肠癌细胞系中同样可以看到这一关系;使用si-RNA干扰DKK4后,能够逆转过表达Snail1引起的细胞系对5-氟尿嘧啶的抵抗结论:DKK4在Snail1介导的肠癌对5-氟尿嘧啶耐药过程中发挥作用。第三部分USP53在肠癌中下调且与耐药相关目的:探讨USP53在肠癌中的表达、临床意义及作用材料及方法:在肠癌患者石蜡及冰冻样本中检测USP53(ubiquitin specific peptidase 53)表达;分析TCGA数据库中信息,分析其对预后及耐药影响;在HCT116细胞系中过表达USP53,检测细胞增殖。结果:免疫组化结果显示肠癌中USP53表达较相应癌旁组织下降;分析TCGA数据库发现USP53的表达越高,预后越好,且对化疗越敏感;在细胞系中过表达USP53能够抑制增殖。结论:USP53在肠癌中表达降低,且和预后及治疗反应性相关。第四部分肠癌病人Organoids培养体系目的:在缺乏Niche factors情况下培养肠癌患者Organoids。材料和方法:在缺乏Niche factors情况下建立类器官(Organoids)培养,并检验相应基因表达情况。对患者Organoids切片进行HE、免疫组织化学染色及特殊染色,观察其形态。结果:部分Organoids在缺乏Niche factors情况下生长及相应基因表达受限。Organoids能够反映肿瘤患者病理类型。结论:在缺乏Niche factors的情况下能够建立部分患者Organoids。