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农田秸秆废弃物的焚烧和遗弃导致了严重的二次污染和资源浪费,秸秆生物炼制燃料乙醇不仅可以避免秸秆处置不当带来的环境问题,而且可使秸秆废弃物资源化、能源化。然而,传统的生物炼制工艺中主要采用游离酿酒酵母发酵,存在菌种扩培成本高、设备利用率不高以及杂菌污染等问题。本研究采用细胞固定化技术,将酵母菌固定化后用于秸秆生物炼制燃料乙醇,使秸秆废弃物转化为燃料乙醇。首先,以2.5%海藻酸钠(w/v)、2%氯化钙(w/v)、2%菌体添加量(w/v,细胞干重),滴落法包埋固定酵母(Saccharomy cescerevisiae BY4742)细胞,在葡萄糖浓度80g/L,pH4.0,10%(v/v)菌体投加量,温度35℃的条件下,进行重复批次循环发酵,每批次发酵72h,共发酵3个批次,探究固定化酵母重复发酵性能。结果表明:酵母菌固定化后发酵时间由72h缩短为48h,固定化技术显著缩短发酵时间;第1、2、3批次最大乙醇得率分别为82%、62%、35%,平均乙醇生产强度0.30g/(L·h),固定化酵母菌随着循环利用次数增加,发酵性能逐渐下降。其次,为减缓固定化酵母重复发酵中发酵性能下降,通过增殖活化、批次短周期发酵、发酵工艺参数优化3种方法对固定化粒子发酵性能进行调控,结果表明:调控后,乙醇生产强度明显提升,发酵效率提高。最佳发酵工艺参数为葡萄糖浓度110g/L,pH4.0,菌体投加量30%(v/v),温度35℃,在此条件下循环发酵5个批次后,每批次发酵12h,5个批次乙醇得率分别为81%、80%、73%、61%、59%,平均乙醇生产强度为3.44g/(L·h)。固定化酵母重复批次发酵中,对发酵性能下降的固定化酵母再次进行增殖活化,能够恢复其发酵性能。在第3批次发酵结束后对固定化酵母增殖活化10h,第4批次乙醇得率恢复至84%。最后,采用固定化酵母以小麦秸秆为发酵底物,在温度为38℃、固体含量16%(w/v)、纤维素酶投加量35FPU/g底物、酵母菌浓度8g/L(以细胞干重计)的条件下进行同步糖化发酵。实验结果表明:发酵120h后,乙醇浓度为28.94g/L,乙醇产率为76%。